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Création du document : 02 Mars 2022 Nom Fonction Date et Signature Auteur(s) FO

Création du document : 02 Mars 2022 Nom Fonction Date et Signature Auteur(s) FOLLY Yao Anani Surveillant du laboratoire Vérificateur(s) Personne validant le document Evolution du document Versio n Date d’application Modification faite par Modifications opérées par rapport à version précédente HÔPITAL STE JOSEPHINE BAKHITA 13 B.P. 119 Agoé-Kové Route de Mission Tové Tel : 00228-70-47-06-62 PROCEDURE DU DOSAGE DU CALCIUM Page Codification : Indice de révision : Date d’application. : Lieu : Distribution : Version : Annexe : Table des matières 1- Objectifs et portée.......................................................................................................................3 2- Abréviations et définitions..........................................................................................................3 3- Tâches, autorisations et responsabilités......................................................................................3 4- Principe......................................................................................................................................3 5- Sécurité et environnement..........................................................................................................3 6- Échantillon :...............................................................................................................................3 7- Équipements et fournitures.........................................................................................................3 8- Réactifs et produits chimiques....................................................................................................4 9- Contrôle de la qualité..................................................................................................................4 10- Mode opératoire......................................................................................................................4 11- Valeurs de référence :.............................................................................................................5 12- Interférences...........................................................................................................................5 13- Valeurs critiques.....................................................................................................................5 14- Formulaires connexes.............................................................................................................5 15- Références..............................................................................................................................5 16- Pièces jointes..........................................................................................................................6 HÔPITAL STE JOSEPHINE BAKHITA 13 B.P. 119 Agoé-Kové Route de Mission Tové Tel : 00228-70-47-06-62 PROCEDURE DU DOSAGE DU CALCIUM Page Codification : Indice de révision : Date d’application. : Lieu : Distribution : Version : Annexe : 1- Objectifs et portée Cette procédure vise à décrire les différentes étapes du dosage du calcium dans le sérum et plasma. 2- Abréviations et définitions CIQ : Contrôle Interne de Qualité SL : Surveillant du laboratoire RQ : Responsable Qualité 3- Tâches, autorisations et responsabilités Tâche Autorisé Responsable Démarrage du spectrophotomètre et maintenance quotidienne RQ, SL SL Mesure à blanc RQ, SL SL Préparation des réactifs RQ, SL SL Préparation des sérums de contrôle RQ, SL SL Passage des contrôles et validation des contrôles RQ, SL SL Passage des échantillons RQ, SL SL Validation analytique RQ, SL SL 4- Principe A pH légèrement acide et en présence d’ions calcium, le metallochromogène Arsenazo III forme un complexe coloré dont l’absorbance mesurée à 650 nm (640-660 nm) est proportionnelle à la concentration en calcium dans le spécimen. 5- Sécurité et environnement - Utiliser les équipements de protection (Gant, blouse, lunettes) - Rincer abondamment à l’eau en cas de contact avec la peau ou les yeux. - Respect la procédure de tri et de gestion des déchets Par mesure de sécurité, tous échantillon doit être traité comme potentiellement infectieux 6- Échantillon : HÔPITAL STE JOSEPHINE BAKHITA 13 B.P. 119 Agoé-Kové Route de Mission Tové Tel : 00228-70-47-06-62 PROCEDURE DU DOSAGE DU CALCIUM Page Codification : Indice de révision : Date d’application. : Lieu : Distribution : Version : Annexe : Matériel Quantité minimale Stabilité Sérum 50 µl 7 jours de 2 à 8° C, 6 mois -20 °C Plasma (héparine) 50 µl 7 jours de 2 à 8° C, 6 mois -20 °C 7- Équipements et fournitures Consommable Embouts de pipette, 10-100 µl Embouts de pipette, 100-1000 µl Tube à hémolyse Matériel et équipement : Spectrophotomètre Micropipette 10-100 µl Micropipette 100-1000 µl 8- Réactifs et produits chimiques Désignation Réactif Conditions de stockage Lieu de stockage Flacon R1 Tampon enzyme 2 à 8 ° C Réfrigérateur Flacon R2 (Etalon primaire) Calcium 100 mg/l 2 à 8 ° C Réfrigérateur Sérum de contrôle normal Sérum -10 à 20 °C Réfrigérateur Sérum de contrôle pathologique Sérum -10 à 20 °C Réfrigérateur - Préparation de la solution de travail : Le réactif est prêt à l’emploi. 9- Contrôle de la qualité Faire au moins un contrôle de qualité (Sérum de contrôle normal, sérum de control pathologique) dans chaque série ou au moins par 24 heures. Procédure de contrôle qualité 10- Mode opératoire o Enregistrement et étiquetage : Les échantillons sont enregistrés après avoir vérifié leurs conformités. o Centrifugation et décantation : Centrifuger à 4000 tours pendant 10 minutes puis décanter le sérum. o Préparation de la liste de travail : Faire la liste de travail o Ramener les réactifs à la température du Laboratoire et préparer les réactifs si nécessaire HÔPITAL STE JOSEPHINE BAKHITA 13 B.P. 119 Agoé-Kové Route de Mission Tové Tel : 00228-70-47-06-62 PROCEDURE DU DOSAGE DU CALCIUM Page Codification : Indice de révision : Date d’application. : Lieu : Distribution : Version : Annexe : o Démarrage du spectrophotomètre et maintenance quotidienne : rinçage de la cuve avec l’eau distillée. Vérifier l’état de la cuve de lecture en faisant une mesure à blanc. Le blanc consiste mesurer la densité optique de l’eau distillée. o Dosage des échantillons : Le dosage des échantillons est fait comme l’indique le tableau ci-dessous Blanc Etalon Dosage Réactif 1ml 1ml 1ml Eau déminéralisée 10 µl Etalon 10 µl Spécimen 10 µl Bien mélanger et incuber 1minute à la température ambiante puis lire à 650 nm (640-660). La coloration est stable minutes à l’abri de la lumière. Il est impératif de valider les résultats des sérums de contrôle normal et pathologique avant d’analyser chaque série d’échantillon. o Calcul Résultat : | (Dosage )|×Concentrationétalon |(Etalon)| o Validation technique : Elle consiste à vérifier le bon déroulement des différentes phases de réalisation des analyses et surtout de la validité des CIQ. o Intervalle de mesure : 2,1 – 150 mg/l, diluer au 1/2 avec du sérum physiologique si la valeur est supérieur à 150 mg/l (3,75 mmol/l). o Facteur de conversion mg/l x 0,0250 = mmol/l 11- Valeurs de référence : Calcémie : 86 – 105 mg/l 12- Interférences Pour éviter les contaminations avec le calcium environnemental, il faut manipuler avec précaution les contrôles, spécimens, et calibrant. Utiliser de préférence des tubes et cuvettes à usage unique, laver la verrerie avec du HCI 1N puis bien rincer avec de l’eau déminéralisée. HÔPITAL STE JOSEPHINE BAKHITA 13 B.P. 119 Agoé-Kové Route de Mission Tové Tel : 00228-70-47-06-62 PROCEDURE DU DOSAGE DU CALCIUM Page Codification : Indice de révision : Date d’application. : Lieu : Distribution : Version : Annexe : Les flacons en plastique ou en verre sont susceptibles d’absorber le calcium durant le stockage. 13- Valeurs critiques Sans objet 14- Formulaires connexes - Fiche de paillasse - Fiche de gestion des CIQ : 15- Références - Normes ISO 15189 - Fiche technique du réactif du dosage du calcium BIOLABO Ref : 90004. 16- Pièces jointes Fiche technique de la notice de réactif en cours d’utilisation HÔPITAL STE JOSEPHINE BAKHITA 13 B.P. 119 Agoé-Kové Route de Mission Tové Tel : 00228-70-47-06-62 PROCEDURE DU DOSAGE DU CALCIUM Page Codification : Indice de révision : Date d’application. : Lieu : Distribution : Version : Annexe : uploads/Management/ procedure-du-dosage-du-calcium.pdf