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Création du document : 02 Mars 2022 Nom Fonction Date et Signature Auteur(s) FO

Création du document : 02 Mars 2022 Nom Fonction Date et Signature Auteur(s) FOLLY Yao Anani Surveillant du laboratoire Vérificateur(s) Personne validant le document Evolution du document Versio n Date d’application Modification faite par Modifications opérées par rapport à version précédente HÔPITAL STE JOSEPHINE BAKHITA 13 B.P. 119 Agoé-Kové Route de Mission Tové Tel : 00228-70-47-06-62 PROCEDURE DU DOSAGE DE TRIGLYCERIDE Code : PDTR-HSJB-01 Version :01 Nombre de pages : Date d’application Table des matières 1- Objectifs et portée.......................................................................................................................3 2- Abréviations et définitions..........................................................................................................3 3- Tâches, autorisations et responsabilités......................................................................................3 4- Principe......................................................................................................................................3 5- Sécurité et environnement..........................................................................................................3 6- Échantillon :...............................................................................................................................4 7- Équipements et fournitures.........................................................................................................4 8- Réactifs et produits chimiques....................................................................................................4 9- Contrôle de la qualité..................................................................................................................4 10- Mode opératoire......................................................................................................................4 11- Valeurs de référence...............................................................................................................5 12- Interférences...........................................................................................................................5 13- Valeurs critiques.....................................................................................................................6 14- Formulaires connexes.............................................................................................................6 15- Références..............................................................................................................................6 16- Pièces jointes..........................................................................................................................6 HÔPITAL STE JOSEPHINE BAKHITA 13 B.P. 119 Agoé-Kové Route de Mission Tové Tel : 00228-70-47-06-62 PROCEDURE DU DOSAGE DE TRIGLYCERIDE Code : PDTR-HSJB-01 Version :01 Nombre de pages : Date d’application 1- Objectifs et portée Cette procédure vise à décrire les différentes étapes du dosage des triglycérides dans le plasma ou le sérum. Elle permet de détecter une anomalie du taux de graisses circulant dans le sang. 2- Abréviations et définitions CIQ : Contrôle Interne de Qualité GPO : Glycérol 3 phosphate Oxydase PAP : Amino Antipyrine SL : Surveillant du laboratoire RQ : Responsable Qualité 3- Tâches, autorisations et responsabilités Tâche Autorisé Responsable Démarrage du spectrophotomètre et maintenance quotidienne RQ, RL RL Mesure à blanc RQ, RL RL Préparation des réactifs RQ, RL RL Préparation des sérums de contrôle RQ, RL RL Passage des contrôles et validation des contrôles RQ, RL RL Passage des échantillons RQ, RL RL Validation analytique RQ, RL RL 4- Principe Test photométrique enzymatique (GPO) basé sur la détermination des triglycérides selon les réactions suivantes : HÔPITAL STE JOSEPHINE BAKHITA 13 B.P. 119 Agoé-Kové Route de Mission Tové Tel : 00228-70-47-06-62 PROCEDURE DU DOSAGE DE TRIGLYCERIDE Code : PDTR-HSJB-01 Version :01 Nombre de pages : Date d’application La concentration de la quinonéimine est proportionnelle à la concentration des triglycérides. 5- Sécurité et environnement - Utiliser les équipements de protection (Gant, blouse, lunettes) - Rincer abondamment à l’eau en cas de contact avec la peau ou les yeux. - Respect la procédure de tri et de gestion des déchets Par mesure de sécurité, tous échantillon doivent être traités comme potentiellement infectieux. 6- Échantillon : Matériel Quantité minimale Stabilité Sérum, Plasma (héparine,EDTA) 50 µl 5 à 7 jours entre 2 et 8° C ; 3 mois – 20 °C 7- Équipements et fournitures Consommable Embouts de pipette, 10-100 µl Embouts de pipette, 100-1000 µl Tube à hémolyse Matériel et équipement : Spectrophotomètre Micropipette 10-100 µl Micropipette 100-1000 µl 8- Réactifs et produits chimiques Désignation Réactif Conditions de stockage Lieu de stockage Flacon R1 Tampon 2 à 8 ° C Réfrigérateur Flacon R2 Enzyme 2 à 8 ° C Réfrigérateur Flacon R3 (Etalon primaire) Triglycérides 2 g/l 2 à 8 ° C Réfrigérateur Sérum de contrôle normal Sérum -10 à 20 °C Réfrigérateur Sérum de contrôle pathologique Sérum -10 à 20 °C Réfrigérateur - Préparation de la solution de travail : Verser le contenu du flacon R2 (Enzyme) dans le flacon R1(Tampon). Mélanger doucement et attendre la dissolution complète (2 minutes environ) - Stabilité : La solution de travail est stable jusqu’à la date de péremption indiquée sur la boite. HÔPITAL STE JOSEPHINE BAKHITA 13 B.P. 119 Agoé-Kové Route de Mission Tové Tel : 00228-70-47-06-62 PROCEDURE DU DOSAGE DE TRIGLYCERIDE Code : PDTR-HSJB-01 Version :01 Nombre de pages : Date d’application 9- Contrôle de la qualité Faire au moins un contrôle de qualité (Sérum de contrôle normal, sérum de control pathologique) dans chaque série ou au moins par 24 heures. Procédure de contrôle qualité 10- Mode opératoire o Enregistrement et étiquetage : Les échantillons sont enregistrés après avoir vérifié leurs conformités. o Centrifugation et décantation : Les échantillons sont centrifugés à 4000 tours pendant 10 minutes puis décanter le sérum. o Préparation de la liste de travail : Faire la liste de travail o Ramener les réactifs à la température du Laboratoire et préparer les réactifs si nécessaire o Démarrage du spectrophotomètre et maintenance quotidienne : rinçage de la cuve avec l’eau distillée. Vérifier l’état de la cuve de lecture en faisant une mesure à blanc. Le blanc consiste mesurer la densité optique de l’eau distillée. o Dosage des échantillons : Le dosage des échantillons est fait comme l’indique le tableau ci-dessous Blanc Etalon Dosage Réactif 1ml 1ml 1ml Eau déminéralisée 10µl Etalon 10 µl Spécimen 10µl Bien mélanger et incuber pendant 5 minutes à 37°C ou 20 minutes à la température ambiante puis lire à 500 nm (4 520). La coloration est stable 1 heure. Il est impératif de valider les résultats des sérums de contrôle normal et pathologique avant d’analyser chaque série d’échantillon. o Calcul Résultat : | (Dosage )|×Concentrationétalon |(Etalon)| HÔPITAL STE JOSEPHINE BAKHITA 13 B.P. 119 Agoé-Kové Route de Mission Tové Tel : 00228-70-47-06-62 PROCEDURE DU DOSAGE DE TRIGLYCERIDE Code : PDTR-HSJB-01 Version :01 Nombre de pages : Date d’application o Validation technique : Elle consiste à vérifier le bon déroulement des différentes phases de réalisation des analyses et surtout de la validité des CIQ. o Intervalle de mesure : 0,1-7 g/l (7,9 mmol/l), diluer au 1/2 avec du sérum physiologique si la valeur est supérieur à 7g/l. o Facteur de conversion g/l x 1, 143 = mmol/l 11- Valeurs de référence Triglycérides : 0,35- 1,60 g/l 12- Interférences Acide ascorbique : Pas d’interférence jusqu’à 25 mg/l. Au-delà, sous-estimation. Bilirubine : Interférence négative à partir de 80 ml/l. Au-delà, sous-estimation. Hémoglobine : Pas d’interférence jusqu’à une concentration de 193 g/dl. Au-delà, sous-estimation. Glycérol libre : Surestimation d’environ 0,10 g/l générée par le glycérol endogène. 13- Valeurs critiques Sans objet 14- Formulaires connexes - Fiche de paillasse - Fiche de gestion des CIQ : 15- Références - Normes ISO 15189 - Fiche technique du réactif du dosage Triglycérides (GPO) BIOLABO Ref : 80019,87319. 16- Pièces jointes Fiche technique de la notice de réactif en cours d’utilisation HÔPITAL STE JOSEPHINE BAKHITA 13 B.P. 119 Agoé-Kové Route de Mission Tové Tel : 00228-70-47-06-62 PROCEDURE DU DOSAGE DE TRIGLYCERIDE Code : PDTR-HSJB-01 Version :01 Nombre de pages : Date d’application uploads/Management/ procedure-du-dosage-du-triglycerides.pdf