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LIGNES DIRECTRICES CONCERNANT LES TRAVAUX ANALYTIQUES EN MICROBIOLOGIE (DR-12-S

LIGNES DIRECTRICES CONCERNANT LES TRAVAUX ANALYTIQUES EN MICROBIOLOGIE (DR-12-SCA-02) Mise à jour 20 mars 2018 PROGRAMME D’ACCRÉDITATION DES LABORATOIRES D’ANALYSE Coordination et rédaction Cette publication a été réalisée par le Centre d’expertise en analyse environnementale du Québec du ministère du Développement durable, de l’Environnement et de la Lutte contre les changements climatiques (MDDELCC). Renseignements Pour tout renseignement complémentaire : Centre d’expertise en analyse environnementale du Québec Ministère du Développement durable, de l’Environnement et de la Lutte contre les changements climatiques Complexe scientifique 2700, rue Einstein, bureau E-2-220 Québec (Québec) G1P 3W8 Téléphone : 418 643-1301 Télécopieur : 418 528-1091 Courriel : ceaeq@mddelcc.gouv.qc.ca Pour vous procurer nos documents, veuillez consulter notre site Web au www.mddelcc.gouv.qc.ca, section « CEAEQ » ou au www.ceaeq.gouv.qc.ca. Référence à citer CENTRE D’EXPERTISE EN ANALYSE ENVIRONNEMENTALE DU QUÉBEC. Lignes directrices concernant les travaux analytiques en microbiologie, DR-12-SCA-02, Québec, Ministère du Développement durable, de l’Environnement et de la Lutte contre les changements climatiques, 2018, 38 p. Dépôt légal – 2018 Bibliothèque et Archives nationales du Québec ISBN 978-2-550-80745-2 (PDF) ISBN-978-2-550-70239-9 (PDF), Édition précédente Tous droits réservés pour tous les pays. © Gouvernement du Québec - 2018 DR-12-SCA-02 Page 3 de 38 AVANT-PROPOS Le présent document s'adresse à tous les laboratoires de microbiologie accrédités par le ministère du Développement durable, de l'Environnement et de la Lutte contre les changements climatiques du Québec. Il précise les lignes directrices auxquelles les laboratoires de microbiologie doivent se conformer. L’application de ces lignes directrices est revue lors de l'évaluation sur site des procédures d’assurance et de contrôle de la qualité effectuée dans le cadre du Programme d'accréditation des laboratoires d’analyse (PALA)1. Tous les éléments dont il est question dans ce document sont vérifiés au cours de l'évaluation sur site et font l'objet d'un rapport d’évaluation. Le laboratoire doit, par la suite, soumettre un rapport de correction des éléments non conformes établis lors de l'évaluation et démontrer l'application effective de son programme d'assurance et de contrôle de la qualité. Des lacunes concernant des éléments touchant les bonnes pratiques de laboratoire peuvent également faire l’objet de non- conformités additionnelles lors des évaluations. Le suivi apporté à ces éléments devrait être le même que celui prévu aux non-conformités soulevées par rapport aux exigences du présent document. La correspondance entre les sections présentées dans ce document et celles apparaissant au chapitre III du document intitulé Programme d'accréditation des laboratoires d'analyse est indiquée entre parenthèses au début de chacune des sections. Page 4 de 38 DR-12-SCA-02 TABLE DES MATIÈRES AVANT-PROPOS ................................................................................................................................. 3 1 LOCAUX ET ENVIRONNEMENT (section 5.3) ................................................................................. 5 1.1 Aménagement ........................................................................................................................................ 5 1.2 Propreté ................................................................................................................................................. 5 1.3 Conditions ambiantes ............................................................................................................................. 5 1.4 Qualité de l’environnement ................................................................................................................... 6 2 MATÉRIEL ET RÉACTIFS (sections 4.6 et 5.9) ................................................................................ 6 2.1 Membranes filtrantes ............................................................................................................................. 6 2.2 Verrerie et autres éléments ................................................................................................................... 7 2.3 Milieux de culture, réactifs et produits chimiques ................................................................................. 8 2.4 Solutions (y compris l’eau de rinçage, l’eau de dilution et l’eau déminéralisée stérile) ........................ 9 2.5 Eau déminéralisée ou distillée .............................................................................................................. 10 2.6 Contenants de prélèvement ................................................................................................................. 11 2.7 Souches de contrôle ............................................................................................................................. 12 3 ÉQUIPEMENT (sections 5.5 et 5.6) ............................................................................................ 13 3.1 Système d’inventaire de l’équipement ................................................................................................ 13 3.2 Autoclave .............................................................................................................................................. 14 3.3 Incubateurs et bains-marie .................................................................................................................. 14 3.4 Réfrigérateurs ....................................................................................................................................... 15 3.5 Thermomètres ...................................................................................................................................... 16 3.6 Équipement de filtration ...................................................................................................................... 17 3.7 Stérilisateurs UV pour désinfection de l’équipement de filtration ...................................................... 17 3.8 pH-mètre .............................................................................................................................................. 18 3.9 Balances ................................................................................................................................................ 18 3.10 Micropipettes ....................................................................................................................................... 19 3.11 Appareil UV servant à l’observation de la fluorescence pour l’obtention d’un résultat analytique .... 19 4 MÉTHODES D'ANALYSE (sections 5.4 et 5.9) .............................................................................. 19 4.1 Calendrier des contrôles de la qualité .................................................................................................. 19 4.2 Contrôle de la stérilité .......................................................................................................................... 19 4.3 Confirmation des résultats ................................................................................................................... 20 4.4 Validation, vérification et suivi de la performance des méthodes ....................................................... 22 4.5 Conformité réglementaire .................................................................................................................... 27 5 TRAÇABILITÉ DE L'INFORMATION (sections 5.8 et 5.10).............................................................. 28 5.1 Échantillonnage et conservation des échantillons ............................................................................... 28 5.2 Demande d’analyse et enregistrement des échantillons au laboratoire ............................................. 29 5.3 Feuille de travail ................................................................................................................................... 30 5.4 Registre de confirmation ...................................................................................................................... 30 5.5 Rapport d’essai ..................................................................................................................................... 31 5.6 Transcription et suivi des données pour les échantillons..................................................................... 31 RÉFÉRENCES .................................................................................................................................... 32 BIBLIOGRAPHIE ................................................................................................................................ 33 ANNEXE I ......................................................................................................................................... 35 DR-12-SCA-02 Page 5 de 38 1 LOCAUX ET ENVIRONNEMENT (section 5.3) 1.1 Aménagement L'aménagement du laboratoire de même que la disposition du matériel et des différents appareils doivent être adéquats pour faciliter le travail des analystes. Les activités de chimie, microbiologie et toxicologie doivent être effectuées dans des locaux séparés. De plus, une séparation efficace doit être aménagée entre les zones avoisinantes lorsque des activités incompatibles s'y déroulent. Les locaux doivent contenir les espaces suivants :  espace de réception des échantillons;  espace d'entreposage;  salle de lavage et de stérilisation;  espace de préparation des milieux de culture;  espace de travail pour l’analyse. 1.2 Propreté La propreté de l’équipement des tables de travail et du laboratoire constitue une condition essentielle à un travail de qualité en microbiologie. Le responsable du laboratoire doit s'assurer que des mesures sont prises pour maintenir la propreté requise à la bonne marche des divers travaux de microbiologie. L'entretien des planchers du laboratoire de microbiologie doit s'effectuer à l'aide d'une vadrouille humide et d'une solution désinfectante. De plus, le désinfectant utilisé pour nettoyer les surfaces de travail doit être d’une efficacité suffisante pour détruire un large spectre de micro-organismes. Les désinfectants utilisés pour le nettoyage des planchers et des surfaces de travail doivent être changés périodiquement. 1.2.1 Calendrier d’entretien Le laboratoire doit disposer d’un calendrier d’entretien des locaux et des tables de travail. Le nom du désinfectant utilisé pour le nettoyage des surfaces de travail et du plancher doit être indiqué sur ce calendrier. 1.3 Conditions ambiantes Des conditions de température particulières sont nécessaires pour assurer le bon fonction- nement de certains équipements, comme les incubateurs et les bains-marie. 1.3.1 Température ambiante Enregistrer la température des salles concernées du laboratoire une fois par jour, lorsque des travaux analytiques sont réalisés. La température ambiante doit se situer entre 16 °C et 27 °C. Page 6 de 38 DR-12-SCA-02 1.4 Qualité de l’environnement Le maintien d'une bonne qualité bactériologique de l'air et des surfaces de travail est nécessaire pour le déroulement normal des travaux de laboratoire. 1.4.1 Air ambiant D'avril à octobre, vérifier mensuellement la qualité bactériologique de l'air ambiant; pour le reste de l'année, vérifier une fois aux trois mois. Un résultat < 15 UFC/1000 cm2 est jugé satisfaisant. Avec un appareil volumétrique, un résultat de < 150 UFC/m3 est également satisfaisant. 1.4.2 Surfaces de travail Vérifier aux trois mois la stérilité des surfaces de travail (incubateurs, espace de réception des échantillons, réfrigérateurs). La stérilité des tables de travail doit être vérifiée mensuellement. Un résultat < 25 UFC/25 cm2 est satisfaisant. 2 MATÉRIEL ET RÉACTIFS (sections 4.6 et 5.9) L’ensemble du matériel et des réactifs utilisés dans le laboratoire doit avoir été contrôlé avant la première utilisation et les critères spécifiés doivent être respectés. Les données brutes doivent être disponibles et facilement accessibles. 2.1 Membranes filtrantes Le laboratoire doit exercer des contrôles sur les nouveaux lots de membranes filtrantes utilisés. La présence des caractéristiques suivantes doit être vérifiée : bonne diffusion du milieu de culture, non diffusion de l'encre du quadrillé et absence de région hydrophobe. 2.1.1 Conserver une copie de la fiche technique de chaque lot utilisé et enregistrer les numéros de lot ainsi que la date de la première utilisation. 2.1.2 Vérifier la conformité des colonies aux caractéristiques des protocoles d’analyse pour chaque nouveau lot, en utilisant les différents milieux de culture employés pour la technique de la membrane filtrante et enregistrer les données obtenues. DR-12-SCA-02 Page 7 de 38 2.1.3 La vérification des colonies sur les membranes déposées sur les milieux permettant la détection simultanée de plus d’un type de micro-organismes (milieux combinés) doit inclure des souches permettant de vérifier les différents types de morphologies coloniales typiques des micro-organismes recherchés. Par exemple, pour le domaine 1, les milieux combinés doivent être vérifiés avec une souche d’Escherichia coli et avec une souche d’un autre coliforme. 2.1.4 Mesurer et enregistrer le pourcentage de récupération des membranes filtrantes. Il doit être supérieur à 80 %. 2.2 Verrerie et autres éléments La verrerie et les contenants de prélèvement utilisés en microbiologie doivent être exempts de tout produit bactériostatique ou bactéricide et être en parfait état après le lavage. L’instruction de travail concernant le lavage de la verrerie et des contenants de prélèvement doit être disponible et affichée dans le laboratoire. 2.2.1 Le laboratoire doit élaborer une instruction de lavage efficace pour ses diverses opérations comprenant au moins les étapes suivantes : lavage au détergent, rinçage à l'eau chaude du robinet, dernier rinçage à l'eau distillée ou déminéralisée. 2.2.2 Pour le lavage à la main, le détergent utilisé doit être exempt de phosphates et son pH doit être neutre. 2.2.3 Vérifier et enregistrer la présence de résidus inhibiteurs acides ou alcalins sur différents articles, y compris la verrerie et les contenants de prélèvement chaque trimestre et lorsque uploads/Management/dlr-12.pdf