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MINISTERE DE L’ENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE UNIVERSIT

MINISTERE DE L’ENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE UNIVERSITE AKLI MOHAND OULHADJ – BOUIRA - FACULTE DES SCIENCES DE LA NATURE ET DE LA VIE ET DES SCIENCES DE LA TERRE DEPARTEMENT DE BIOLOGIE Réf : ……./UAMOB/F.SNV.ST/DEP.BIO/2017 MEMOIRE DE FIN D’ETUDES EN VUE DE L’OBTENTION DU DIPLOME MASTER Domaine : Sciences de la Nature et de la Vie Filière : Sciences Biologiques Spécialité : Analyses Biologiques et Biochimiques Présenté par : Mlle. DAOUADI Rebh El Machi Thème Etude de l’activité antioxydante et anti - inflammatoire des feuilles de l’espèce Urtica dioica L. Soutenu le : 05 / 10 / 2017 Devant le jury composé de : Nom et Prénom Grade Mr. TAFER Mourad MAA Univ. de Bouira Président Mr. MOUNI Lotfi MCA Univ. de Bouira Promoteur Mme. BOUDRAA Hayet Mme. DOUMANDJI Waffa Doctorante MAA Univ. de Bouira Univ. de Bouira Co-promotrice Examinatrice Année Universitaire : 2016/2017 Dédicaces Au Nom d’ALLAH clément et miséricordieux, Louange à ALLAH pour sa grâce et sa miséricorde, Louange à ALLAH pour la science qui nous a offerte. Je remercie ALLAH, le tout puissant, pour m’avoir donnée la force et la patience. Je dédie ce modeste travail à Mes très chers parents, A mon père Farid, El-Ghali, le noble, l’homme sacrifiant et guerrier pour sa famille. Il est mon exemplaire dans la vie et il le restera à vie, je lui dédie avec fierté ce mémoire qui reflète le fruit de l’éducation et l’attention qu’il ma tant réservé, je suis très reconnaissante et j’aurai tant aimé partager la joie de ma réussite avec lui. A l’ Hnina ma mère qui ma supportée et ma aidée dans les pires moments, car tu a toujours crue en moi, je suis que suis maintenant ; Merci Maman. A ma grande mère maternelle « El baraka », qu’Allah vous protège et vous donne de la santé, sans oublier ma chère grande mère paternelle «Fatma» qu’Allah bénisse son âme et fait son lieu de repos El ferdawss. Je ne t’oublierai jamais. A Mes tantes, qui m’ont toujours soutenue. Merci, merci infiniment. A mes frères et mes sœurs, mon petit frère ‘El mazozi’ Manou, ma chère grande sœur Saliha et sa fille, ma nièce la charmante princesse Hibatt Allah, qu’Allah la guéri et lui donne de la santé et le bonheur ; sans oublier mon neveux le petit patron Khalil el Rahman. A toute ma famille A toutes mes amies. A tous ceux qui me sont chers. En fin, mes vifs remerciements à toutes Personnes ayant contribué de loin ou de prés à Accomplir ce travail. Rebh el machi Remerciements Avant toute chose, je remercie Dieu, le tout puissant, pour m’avoir donnée la force et la patience. J’exprime d’abord mes profonds remerciements et ma vive connaissance à Mr. MOUNI Lotfi, Maître de conférences à la faculté des Sciences de la Nature et de la Vie et des Sciences de la Terre, Université de BOUIRA pour avoir encadré et dirigé ce travail et pour leur accueil au sein du Laboratoire du département de Biologie : Laboratoire de recherche scientifique et qui a mis à ma disposition les condition matérielles nécessaires pour la réalisation de ce travail tout au long la période de recherche qu’il trouvent ici mon respect et reconnaissance. Je tiens également à adresser mes vifs remerciements à ma Co promotrice, Doctorante Mme. Boudraa Hayet, pour avoir dirigé ce travail avec une grande rigueur scientifique, sa disponibilité, sa patience et ses conseils m’ont permet de réaliser ce travail. J’adresse mes sincères remerciements à Mr.TAFER Mourad, Maître assistant à l'Université de Bouira d’avoir accepté de présider le jury. J’exprime mes vifs remerciements à Mme. DOUMANDJI Waffa, Maître assistant à l’Université de Bouira, pour l’honneur qu’elle nous a fait en acceptant d’examiner ce mémoire. Je remercie tous ceux qui m’ont aidé de prés ou de loin et contribuer à réaliser ce mémoire. Introduction générale 1 Introduction générale En Algérie, la phytothérapie est utilisée depuis toujours dans la médecine traditionnelle, mais les règles de leur utilisation manquent parfois de rigueur et ne tiennent pas compte des nouvelles exigences de la thérapeutique moderne. Ces dernières années, beaucoup de recherches se sont orientées vers la valorisation de la médecine traditionnelle en vue de vérifier la sûreté et l’efficacité des plantes utilisées et d’établir des règles scientifiques pour l’usage de ces plantes. Parmi ces plantes médicinales, l'ortie dioïque ou Urtica dioica L. qu’est une des rares plantes que l'on peut reconnaître les yeux fermés, avec son contact irritant, mais négligeant ainsi son utilisation. Consommée comme légume depuis la préhistoire, l’ortie dioïque possède des vertus médicinales et considérée comme une des plantes les plus précieuses. Ainsi, au travers des siècles, on lui attribua de nombreuses propriétés: aphrodisiaque, expectorante, diurétique, anti diarrhéique, hémostatique, antidiabétique, emménagogue, dépurative, reconstituante. Elle agit également efficacement sur la peau et ses affections (Draghi, 2005). L’inflammation est un mécanisme de défense indispensable pour l’intégrité de l’organisme. Cependant, elle se trouve impliquée dans un très grand nombre de pathologies humaines (Weill et al., 2003). D’une autre part, le stress oxydant est également à l’ origine de plusieurs maladies humaines allant de l’inflammation au cancer tout en passant par les maladies cardio-vasculaires et l’arthrite rhumatoïde (Kohen et Nyska, 2002). De ce fait, la recherche de substances d’origine végétale douées d’activités anti-inflammatoires et/ou antioxydantes s’avère très utile pour l’amélioration de la santé humaine tout en évitant les effets indésirables des molécules de synthèse. Dans ce contexte s’inscrit ce présent travail de recherche dont le but principale consiste à étudier l’activité anti-inflammatoire et antioxydante des extraits des feuilles de la plante Urtica dioica L. ; connue en Algérie sous le nom Horaiig ou Azekdouf. La première partie de ce travail concerne tout d'abord l’étude bibliographique, qui comporte la présentation de la plante Urtica dioica. Elle est suivie par une synthèse des Introduction générale 2 principaux activités pharmacologiques relatives à Urtica dioica, la deuxième partie traite est consacrée aux matériel et méthodes utilisés, suivit des résultats expérimentaux et discussion. Une conclusion générale ainsi que des perspectives de recherche sont apportées pour compléter le présent travail. Sommaire Sommaire Liste des tableaux Liste des figures Liste des abréviations Introduction générale …………………………………………………………................1 Première partie : Etude Bibliographique Chapitre I : Présentation d’Urtica dioica I.1. Présentation de l’ortie ……………………………………............................................3 I.2. Dénomination ………………………………………………………………………....3 I.3. Classifications…………………………………………………………………………4 I.4. Description botanique ………………………………………………………………...4 I.4.1. Le poil urticant ……………………………………………………………………..7 I.5. Origine et distribution ………………………………………………………………...8 I.6. Composition chimique ……………………………………………………………….9 I.6.1. Composition chimique des parties aériennes ……………………………………...10 I.6.2. Composition chimique des racines ………………………………………………...11 I.6.3. Composition chimique des fruits et graines ……………………………………….12 I.7. Usages médicinaux traditionnels …………………………………………………….12 Chapitre II : Activités pharmacologiques d’Urtica dioica II.1. Propriétés pharmacologiques et travaux antérieurs sur Urtica dioica ………………..13 II.1.1. Activité antioxydante....………………………………………………………..13 II.1.2. Activité anti-inflammatoire …………………………………………………….13 II.1.3. Activité antiproliférative ……………………………………………………….13 II.1.4. Activité immuno-modulatrice…………………………………………………..13 II.1.5. Propriété analgésique et antinociceptive……………………………………….14 II.1.6. Propriété antiulcéreuse …………………………………………………………14 II.1.7. Propriétés anti-infectieuses ……………………………………………………14 Sommaire II.1.8. Activité antidiabétique………………………………………………………….14 II.1.9. Action anti-hypertensive……………………………………………………….14 II.1.10. Action sur l’agrégation plaquettaire…………………………………………..15 II.1.11. Action sur l’hyperlipidémie et l’athérosclérose ……………………………….15 II.1.12. Activité antiallergique…………………………………………………………15 II. 2. Rappels sur les activités biologiques étudiées …………………………………….15 II.2.1. Activité antioxydante …………………………………………………………15 II.2.2. Définition d’un radical libre ..............................................................................15 II.2.3. Les antioxydants………………………………………………………………16 II.2.3. 1. Les antioxydants primaires………………………………………………….16 II.2.3. 2. Les antioxydants secondaires ………………………………………………17 II.2.4. Balance Oxydants /Antioxydants et stress oxydant…………………………...18 II.3. Activité anti-inflammatoire ………………………………………………………...18 II.3.1. Définition de l’inflammation …………………………………………………..18 II.3.2. L’inflammation aiguë…………………………………………………………...18 II.3.3. L’inflammation chronique………………………………………………………19 II.3.4. Cellules impliquées dans la réaction inflammatoire……………………………19 II.3.5. Médiateurs de la réaction inflammatoire………………………………………..19 II.3.6. Les anti-inflammatoires ………………………………………………………...21 II.3.7. Anti-inflammatoires d’origine végétale…………………………………………21 Deuxième partie : Etude Expérimentale Chapitre III : Matériel et méthodes III.1. Matériel végétal …………………………………………………………………….22 III.1.1. Lavage…………………………………………………………………………22 III.1.2. Séchage ……………………………………………………………………….22 III.1.3. Broyage ……………………………………………………………………….22 III.1.4. Stockage ………………………………………………………………………23 III.2. Préparation des extraits éthanoliques bruts ………………………………………...24 Sommaire III.3. Détermination de taux d’humidité ………………………………………………..25 III.4. Dosage des cendres ………………………………………………………………..25 III.5.Etude phytochimique des extraits ………………………………………………….26 III.5.1. Analyses qualitatives …………………………………………………………….26 III.5.1.1. Essais de caractérisation en tube…………………………………………........26 a) Caractérisation des flavonoïdes ………………………………………………….26 b) Caractérisation des tanins ………………………………………………………..26 c) Caractérisation des quinones libres……………………………………………….26 d) Caractérisation des terpanoïdes ………………………………………………….27 e) Caractérisation des saponosides ………………………………………………….27 III.5.2. Analyses quantitatives ………………………………………………...................27 III.5.2.1. Dosage des polyphénols totaux ……………………………………………27 III.5.2.2. Dosage des flavonoïdes ……………………………………………………28 III.5.2.3. Dosages des tanins …………………………………………………………28 III.6. Tests des effets biologiques ………………………………………………………..28 III.6.1. Test anti radicalaire au DPPH ………………………………………………...28 III.6.2. Test de l’activité anti-inflammatoire………………………………………….30 Chapitre IV : Résultats et discussions IV.1. La détermination du taux d’humidité……………………………………………..32 IV.2. Dosage des cendres………………………………………………………………..33 IV.3. Résultats de l’étude phytochimique………………………………………………..34 IV.3.1. Résultats de l’analyse qualitative………………………………………………...34 IV.3.2. Résultats de l’analyse quantitative……………………………………………....36 IV.3.2.1 Dosage des différentes substances phénoliques ……………………………......36 IV.3.2.1.1. Résultat dosage des polyphénols totaux…………………………………36 IV.3.2.1.2. Résultat dosage des flavonoïdes ………………………………………...38 IV.3.2.1.3. Résultat dosage des tanins ………………………………………………40 IV.4. Résultats des tests des effets biologiques…………………………………….........41 IV.4.1. Résultat du test anti radicalaire au DPPH …………………………………...41 IV.4.2. Résultat du test de l’activité anti-inflammatoire in vitro …………………….43 Sommaire Conclusion et perspectives……………………………………………………………….46 Références bibliographiques Liste des tableaux Liste des tableaux N° Titre Page I Classification botanique d’Urtica dioica. 4 II Composition chimique des parties aériennes d’Urtica dioica. 10 III Composition chimique de la racine d’Urtica dioica. 11 IV Origines cellulaires et effets des principaux médiateurs inflammatoires. V Résultats des tests préliminaires des flavonoïdes, des tanins, des quinones libres, des terpanoïdes et des saponosides sur l’extrait d’Urtica dioica. uploads/Science et Technologie/loldedr.pdf