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Bechir Djazouli Mahamat 17i2627 Bios L3 La chromatographie est une technique de

Bechir Djazouli Mahamat 17i2627 Bios L3 La chromatographie est une technique de séparation des substances chimiques (mélange homogène liquide ou gazeux) qui repose sur des différences de comportement entre une phase mobile courante et une phase stationnaire (ou phase fixe). On peut classer les méthodes chromatographiques d'après la nature des phases utilisées ou celle des phénomènes mis en oeuvre dans la séparation. Selon la technique chromatographique mise en jeu, la séparation des composants entraînés par la phase mobile, résulte soit de leur adsorption et de leur désorption successives sur la phase stationnaire, soit de leur solubilité différente dans chaque phase. Phase mobile et phase fixe La phase mobile en chromatographie peut être : soit un gaz (chromatographie en phase gazeuse), la phase mobile est alors appelée gaz vecteur ou gaz porteur ; soit un liquide (chromatographie sur papier, couche mince ou colonne), la phase mobile est alors appelée éluant. La phase fixe peut être solide ou liquide. Les solides, silice ou alumine traitées, permettent la séparation des composants des mélanges grâce à leurs propriétés adsorbantes. Ils peuvent être employés comme remplissage d'une colonne (chromatographie par gravité et chromatographie à haute performance ou HPLC) ou étalés en couche mince sur une plaque de verre, d'aluminium ou sur une feuille de matière plastique (chromatographie sur couche mince ou CCM). La phase fixe peut aussi être constituée par un liquide imprégnant un support solide ou encore par une chaîne carbonée fixée sur un support (phase greffée). Ainsi en chromatographie sur papier, la phase fixe est formée par l'eau que les molécules de cellulose du papier adsorbent, alors qu'en chromatographie en phase gazeuse, elle est constituée d'un liquide peu volatil et thermiquement stable imprégnant un granulé poreux. Chromatographie sur couche mince (CCM) Principe de la CCM Mardi 30 juin 2020 CHROMATOGRAPHIE SUR COUCHE MINCE ET APPLICATION EN MEDECINE INTRODUCTION GÉNÉRALE La chromatographie sur couche mince s'effectue généralement sur une fine couche de silice (phase stationnaire) déposée sur un support. Le mélange à étudier est ensuite posé à l'aide d'un capillaire à environ 1 cm du bord puis placé dans une cuve contenant l'éluant. Le niveau de l'éluant devant être en dessous du produit déposé. La cuve de chromatographie est ensuite refermée par un couvercle. Pour une meilleure séparation, on peut placer un papier filtre sur toute la hauteur de la cuve. Celui-ci se charge de solvant par capillarité ce qui permet une meilleure saturation de la cuve. L'éluant migre sur la plaque de silice par capillarité et entraîne les composés du mélange étudié. Si les vitesses de migration des composés sont différentes, ils seront séparés. La plaque de chromatographie est ensuite lue directement si les composés sont visibles, ou placé sous une lumière UV. Ils peuvent également être révélés en pulvérisant une solution d'acide sulfurique puis chauffé dans une étuve. Des plaques avec révélateurs à la fluorescéine sont également disponible. Placées sous la lumière UV, les taches apparaissent sans avoir besoin d'avoir recours à un révélateur. Ne pas oublier de tracer le front du solvant dès la sortie de la plaque de la cuve avant son évaporation. Exemple d'élution en chromatographie sur couche mince Exemple d'élution en CCM On détermine le ratio frontal Rf = L1/L2 étant le rapport entre la distance parcourue par le soluté divisé par la distance parcourue par le front du solvant. Le principe de séparation des composés par CCM est proche de celle en HPLC. Le mélange est placé sur la plaque de silice à l'aide d'une pipette pasteur. Le principal intérêt de la CCM est l'identification rapide des composés d'un mélange. En contre partie, l'analyse est uniquement qualitative et ne permet pas le dosage d'un composé. Toutefois, ceci est de moins en moins vrai avec l'apparition de chomatographie sur couche mince haute performance (HPTLC). Ici de dépôt du produit à analyser est automatisé avec une précision extrême ce qui permer une quantification. Applications de la chromatographie sur couche mince en medecine Analyse biochimique La chromatographie sur couche mince est employée souvent pour isoler, comparer, et caractériser les composés et les métabolites du sang, du sérum, des liquide organiques, et de l'urine. Phytochimie Recensement des composés en médicaments traditionnels Les médicaments traditionnels basés sur des centrales et des extraits de centrale sont très utilisés dans plusieurs pays. Cependant, les composantes actives en beaucoup de tels médicaments sont inconnues. En pareil cas, la chromatographie sur couche mince peut être effectuée sur des échantillons de plante pour séparer les composantes. Les différentes centrales peuvent produire différentes métabolites basées sur l'emplacement et d'autres conditions. Ainsi, la chromatographie sur couche mince peut également être employée pour différencier la condition métabolique d'une centrale basée sur son emplacement et conditions environnantes. Industrie pharmaceutique Études de stabilité Des études de stabilité sont requises par administration de médicaments où la stabilité des médicaments enregistrés doit être vérifiée. La chromatographie sur couche mince peut être particulièrement utile dans de tels tests, pendant que plusieurs endroits peuvent être simultanément faits fonctionner pour comparer et contraster. Les résultats peuvent également être facilement conçus et les endroits qui ne déménagent pas ou n'importe quel changement du nombre d'endroits peuvent indiquer des changements de la nature et de la stabilité chimiques d'un médicament. Recensement des médicaments en liquide organiques La chromatographie sur couche mince peut être employée dans des études légales où des liquide organiques, tels que l'urine et le sang peuvent être vérifiés pour la présence des médicaments. Des médicaments acides et neutres peuvent être recensés à l'aide de la silice d'octadecyl pendant la phase stationnaire, alors que la silice ordinaire et la silice d'octadecyl peuvent être employées pour recenser les médicaments fondamentaux. Recensement des résidus de médicament en nourriture La chromatographie sur couche mince peut être employée pour recenser la présence des résidus de médicament et les antibiotiques en nourriture, telle que la volaille, boeuf, porc, lait, pêchent notamment. Profil métabolique des médicaments Différentes métabolites actuelles dans un médicament peuvent être séparées utilisant la chromatographie sur couche mince. Surveillance de la pureté des médicaments La chromatographie sur couche mince a été employée surveillent quantitativement la pureté de plusieurs médicaments, y compris des sédatifs, des antihistaminiques, des analgésiques, des tranquillisants, et des stéroïdes. Les mélanges de la réaction de examen La chromatographie sur couche mince peut être employée pour étudier si une réaction est complète. Au début d'une réaction, l'endroit entier est occupé par le produit de départ. Pendant le progrès de la réaction, l'endroit du produit de départ continue la réduction, alors que l'endroit des produits continue l'augmentation. À la fin de la réaction, l'endroit du produit de départ est complet allé, et seulement un endroit du produit peut être vu de la plaque. Ainsi, l'absence totale de l'endroit commençant peut être employée pour marquer la fin d'une réaction. uploads/Sante/ ccm-et-application-en-medecine.pdf