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01 02 03 04 05 06 INTRODUCTION COLORATIN DE FROTTIS SQNGUIN BIBLIOGRAPHIE EXAME

01 02 03 04 05 06 INTRODUCTION COLORATIN DE FROTTIS SQNGUIN BIBLIOGRAPHIE EXAMEN DE FROTTIS SANGUIN CONCLUSION SOMMAIRE REALISATION DE FROTTIS SANGUIN Introduction -Définition. -But. -Principe. 01 INTRODUCTION Comme nous savons qu'il existe de nombreuses maladies peuvent affecter l’être humain et chaque maladie a un moyen de la détecté, en ce qui concerne les composants du sang dans ce cas le médecin demande à leur patient de faire quelques tests, dont le frottis sanguin. Définition • Le frottis sanguin est un examen biologique hématologique complet, qui permet d'analyser les cellules sanguines d'un patient à partir d’un échantillon de sang étalé sur une lame de microscope. • Cet examen sanguin est généralement mis en place pour établir, approfondir ou confirmer un diagnostic. • Ce nom "FROTTIS SANGUIN" à plusieurs synonymes : Frottis de sang périphérique, formule sanguine au microscope, morphologie des globules rouges, ce test est fait dans un laboratoire médical mais pour faire un frottis sanguin. But • Ce test est lié aux cellules du sang, donc il peut être effectué lorsque le médecin soupçonne l'existence d'une carence, d'une maladie ou d'un trouble qui affecte la production des cellules sanguines, plus clairement le frottis sanguin est utilisé pour : -d'analyser qualitativement et quantitativement chaque type de cellule sanguine: globules rouges (hématies), globules blancs (leucocytes) et plaquettes (thrombocytes). -d’observer la morphologie et évaluer l'aspect et le nombre de cellules sanguines. -d’établir la formule leucocytaire par l’identification des différents types de leucocytes et distinguer le pourcentage de chacun. Principe • Il s’agit de préparer un étalement mince d’une goutte de sang sur une lame de verre , Après coloration, fixation et observation de frottis au microscope, on pourra effectuer l'étude morphologique des éléments figurés du sang, et déterminer s'il y a anomalies de présence, d'aspect ou de nombre de cellules. La Réalisation de Frottis sanguin : -Matériel utilisé. -Protocole. -Qualité de frottis sanguin. 02 REALISATION DE FROTTIS SANGUIN Afin d'obtenir un échantillon de sang utilisé dans la réalisation de Frottis sanguin, il faut d'abord effectuer un prélèvement sanguin, un professionnel de la santé prélève un échantillon de sang à partir d’une veine du bras à l’aide d’une aiguille, (ou parfois au bout du doigt chez les adultes /au talon chez le nourrisson), après une désinfection soigneuse de la zone d'injection par un antiseptique, il noue un garrot sur le bras afin de rendre les veines plus visibles. Le prélèvement se réalise à condition d'utiliser un tube " EDTA " (Éthylène Diamine Tétra-Acétique) contenant une substance anticoagulante pour assurer le succès de frottis sanguin. Matériel utilisé : Une paire de gants. Une lame dégraissée. Une lame à bords rodées ou étaleur. Colorant May Grunwald et Giemsa. Une pipette Pasteur. Un bac de coloration. Microscope optique. Protocole : 1- Après le prélèvement, Déposer une goutte de sang (la plus petite possible) à 1 cm de bord d'une lame avec une pipette Pasteur. 2- Placer sur la goutte une lamelle inclinée à 45° de façon à ce que le sang s'étale sous la lamelle par capillarité (pour obtenir une seule couche de cellules). 1cm lame pipette Pasteur 45° étaleur Protocole : 3- Faire glisser la lamelle maintenue à 45° le long de la lame pour étaler uniformément la goutte. 4- Soulever l'étaleur à 2cm de l'extrémité opposée à la goutte de sang. glisser Protocole : 5- Sécher la lame en l'agitant dans l'air. 6- Tremper la lame 5 fois de suite pendant une seconde dans l'éthanol pour fixer le frottis. Frottis sanguin Éthanol pur 1 sec x 5 Qualité de frottis sanguin :  Le frottis sanguin doit être régulier (sans coupures), avec des bords parallèles à la lame mais distants de ceux-ci et avec l'extrémité arrondie ou en pinceau. Qualité de frottis sanguin : Le frottis sanguin ne doit pas être trop épais ni trop mince afin d'obtenir une seule couche de cellules. Ne doit pas présenter de trous ni de stries (lame mal dégraissée). COLORATIN DE FROTTIS SANGUIN -La coloration de MGG. -Principe de coloration MGG. -Coloration de WRIGHT. 03 La Coloration de May-Grünwald Giemsa (MGG) : La coloration au MGG (parfois appelée la coloration de Pappenheim) est une méthode de coloration utilisée en hématologie pour mettre les cellules de sang en évidence et les différencier lors des préparations cellulaires, Cette coloration repose sur l'action combinée de 2 colorants neutres le premier colorant c'est le May-Grünewald, Et le deuxième est le Giemsa. La Coloration de May-Grünwald Giemsa (MGG) : 1- Placer la lame sur un support horizontal situé au- dessus d’un bac de coloration. 2- Mettre le May-Grünewald pur de façon à recouvrir complètement le frottis et laisser agir 3 min. La Coloration de May-Grünwald Giemsa (MGG) : 3- Plonger la lame dans un bain de May Grünwald dilué au ½ en eau neutre durant 3 min. 4- Plonger la lame dans un bain de Giemsa dilué au 1/10ème durant 20 min. 3 min 20 min La Coloration de May-Grünwald Giemsa (MGG) : 5- Rincer doucement la lame à l’eau. 6- Essuyer le dessous de la lame et laisser la sécher à l’air en position inclinée . PRINCIPE DE COLORATION (MGG) : Cette méthode panoptique est basée sur l'emploi successif de deux colorant : -Le May-Grünwald qui fixe les frottis par son alcool méthylique et colore les éléments acidophiles et les granulations spécifique des leucocytes. -Le Giemsa qui colore surtout les noyaux et les parties azurophiles. Coloration de Wright : Très utilisé, cette méthode permet une bonne différenciation des cellules grâce au colorant de Wright. Celui-ci est composé de bleu de méthylène, d'éosine et d'azur de méthylène en solution dans le méthanol. EXAMEN DE FROTTIS SANGUIN -L'observation du frottis sanguin. -L'interprétation des résultats (GR ,GB, Plaquettes) 04 L’OBSERVATION DU FROTTIS SANGUIN : L’observation du frottis sanguin par un œil expert permet de : distinguer les formes anormales des globules rouges, des globules blancs (lymphocytes immatures) et des plaquettes (Amas plaquettaires). La goutte de sang étalée sur la lame contient des millions de globules rouges, des milliers de globules blancs, et des centaines de milliers de plaquettes. Image 01: observation d’un frottis sanguin. L’OBSERVATION DU FROTTIS SANGUIN : Sous le microscope , Il est possible de distinguer cinq différents types de globules blancs, des globules rouges (le nombre et la forme), ainsi que le nombre et l’aspect des plaquettes. L’OBSERVATION DU FROTTIS SANGUIN : En plus , nous pouvons également trouver dans le sang des parasites pathogènes, des virus, des bactéries cela indique la présence d'une maladie. Image 02: présence des parasites. Image 03 : présence d’une anémie. L’OBSERVATION DU FROTTIS SANGUIN : De nos jours, un appareil développé appelé l’automate de cytologie cellulaire (compteur automatique de globules) est utilisé pour compter le nombre de cellules, elle a remplacé une bonne partie de lecture de lames de routine, mais cet automate compte et différencie habituellement les GR, les GB et les plaquettes en fonction de leur forme, de leur taille, et de leurs propriétés électriques ou photométriques. L’OBSERVATION DU FROTTIS SANGUIN : Il peut y avoir quelques variations dans les nombres et types de chaque cellule en raison d'une variété de stimuli physiologiques et externes. L'utilisation d'un instrument automatisé peut souvent permettre de détecter la présence de cellules anormales, mais l’appareil n'a pas la capacité de les classer définitivement. Les fragments de cellules et les agrégats plaquettaires, en particulier s’ils sont de grande taille, peuvent être considérée à tort comme des globules blancs, ce qui peut induire une fausse augmentation des globules blancs. Un technicien de laboratoire ou un biologiste médical peuvent voir ces anomalies sur un frottis sanguin et ont été formés pour les identifier et les classer de façon appropriée. L’interprétation des résultats : Globules rouges Les résultats de l’analyse du frottis sanguin ne permettent pas toujours d’établir un diagnostic mais indiquent souvent la présence d'une affection sous-jacente et sa gravité, et suggèrent qu’il est nécessaire d’effectuer des tests complémentaires. Les résultats qu’on peut obtenir à partir du frottis sanguin sont les suivants : Globules Blancs Plaquettes Globules rouges (GR) •Les Globules rouges à l'état normal : - Nombre : chez l'homme on estime que le nombre normal est compris entre 4 et 5,7 millions par mm3 de sang, chez la femme est compris entre 3,8 et 5,3 millions par mm3. - Forme et taille : de taille uniforme (diamètre de 7 µm) et n'ont pas de noyau. • La présence de nombreuses cellules qui sont différentes entre elle, en forme ou en taille peut indiquer la présence d’une anomalie , Parmi les anomalies possibles : -L’anisocytose : qui correspond à des variations de taille des globules rouges. Microcytes : Sont les globules rouges plus petits que 7 µm Macrocytes : Sont les globules rouges de plus de 7 µm - La poïkilocytose : qui correspond à des variations de formes des globules rouges. *Des anomalies de couleur peuvent aussi être décelées . La poïkilocytose. Globules Blancs (GB) • Les globules blancs ont cinq principales sortes sont : 1-Neutrophiles. 2- Lymphocytes. 3- Monocytes. 4- Éosinophiles 5- Basophiles. • Le nombre normal total uploads/Sante/ frottis-sanguin-g3.pdf