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At18 identification d amp 039 une bacterie pathogene

AT Identi ?cation d ? une bactérie pathogène A l ? hôpital malgré les mesures d ? hygiène mises en place les infections nosocomiales représentent un risque majeur pour les patients hospitalisés notamment les plus faibles et les plus fragiles ou ceux qui ont subi une intervention chirurgicale On se propose ici d ? identi ?er une bactérie responsable d ? infection nosocomiale Objectifs technologiques ?Techniques d ? ensemencement ensemencement d ? une gélose VF d ? un milieu de Hugh et Leifson ? Réalisation du test oxydase Dossier technique ?? Fiche technique n La gélose lactosée au BCP ?? Fiche technique n Le milieu de Hugh et Leifson ?? Fiche diagnostic n Di ?érenciation des bacilles Gram ?? cultivant en aérobiose sur milieu ordinaire Ré exion préliminaire Q Compléter la rubrique composition et rôles des composants ? de la ?che technique n Q Présenter la manipulation à réaliser sous forme d ? un organigramme PREMIER JOUR Réalisation pratique La bactérie isolée a été mise en culture sur gélose nutritive et incubée heures à C En utilisant le dossier technique fourni T - Réaliser une suspension bactérienne en eau distillée stérile en tube à hémolyse T - A partir de la suspension bactérienne réaliser ? Un frottis coloré par la méthode de Gram ? L ? ensemencement de la gélose Viande-Foie VF pour rechercher le type respiratoire ? L ? ensemencement de la gélose Hugh et Leifson HL pour rechercher la voie d ? attaque du glucose ? L ? isolement sur la gélose lactosée au BCP coulée en bo? te de Pétri a ?n de véri ?er la pureté de la culture repiquée et de lire le caractère LACTOSE en deuxième jour T - A partir de la culture sur gélose nutritive réaliser le test d ? orientation de diagnostic adapté Présentation et exploitation des résultats Q Véri ?er la pureté de la culture étudiée Q Réaliser une description macroscopique d ? une colonie isolée Q Réaliser une description microscopique des bactéries colorées par la méthode de Gram Q Donner le résultat obtenu au test d ? orientation réalisé à T Q En vous aidant de la ?che diagnostic n proposer une orientation de la souche étudiée vers la famille ou le genre présumé CDEUXIEME JOUR Lecture des résultats Q Véri ?er la pureté de la culture sur la gélose lactosée au BCP et valider la lecture des milieux ensemencés VF et H L si la culture est bien pure Q Réaliser la description macroscopique des colonies isolées sur la gélose lactosée au BCP par la lecture du caractère lactose Q Lire les milieux ensemencés Gélose VF type respiratoire Gélose HL voie d ? attaque du glucose Interprétation et conclusion Q En rassemblant tous les caractères pertinents conclure par une identi ?cation de la famille ou du genre de la souche étudiée en utilisant la ?che diagnostic n Q Sachant que dans la famille des entérobactéries certains genres fermentent le lactose et d ? autres ne le fermentent pas