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Sda milieu culture FICHE TECHNIQUE GELOSE DE SABOURAUD DEXTROSE SDA DENOMBREMENT DES LEVURES ET MOISISSURES BK HA BM BM BM DOMAINE D ? UTILISATION La gélose de Sabouraud Dextrose SDA permet la culture l ? isolement et le dénombrement des levures et des mo

FICHE TECHNIQUE GELOSE DE SABOURAUD DEXTROSE SDA DENOMBREMENT DES LEVURES ET MOISISSURES BK HA BM BM BM DOMAINE D ? UTILISATION La gélose de Sabouraud Dextrose SDA permet la culture l ? isolement et le dénombrement des levures et des moisissures pour le contrôle de stérilité des produits pharmaceutiques cosmétiques ou alimentaires PREPARATION Préparation du milieu déshydraté Mettre en suspension g de milieu déshydraté BK dans litre d ? eau distillée ou déminéralisée Porter lentement le milieu à ébullition sous agitation constante et l ? y maintenir durant le temps nécessaire à sa dissolution Répartir en tubes ou en acons Stériliser à l ? autoclave à C pendant minutes ? Reconstitution g L ? Stérilisation min à C Préparation du milieu prêt-à-liqué ?er ou du milieu préparé en acons Faire fondre le milieu ainsi préparé ou prêt-à-liqué ?er BM pendant le minimum de temps nécessaire à sa reliquéfaction totale Refroidir et maintenir le milieu à - C Pour un ensemencement en surface couler en bo? tes de Petri stériles et laisser solidi ?er sur une surface froide Faire sécher les bo? tes à l ? étuve couvercle entrouvert Notes Tout chau ?age excessif du milieu conduit à la dénaturation de l ? agar en pH acide et par conséquent à l ? obtention d ? un milieu trop mou Si nécessaire ajouter stérilement mL de supplément sélectif reconstitué Gentamicine mg se référer à la ?che technique du BS ou et Chloramphénicol mg se référer à la ?che technique du BS à mL de milieu Bien homogénéiser l'ensemble MODE D ? EMPLOI Microbiologie cosmétique NF EN ISO Transférer mL de la suspension dans une bo? te de Petri stérile Couler environ mL de milieu Homogénéiser parfaitement et laisser solidi ?er sur une surface froide ? Ensemencement En profondeur ? Incubation à h à C Incuber à C de heures à heures Note Pour la préparation des souches de référence ensemencer la suspension à la surface du milieu pré-coulé BM ou BM ou du milieu préparé en bo? tes et incuber à C pendant heures à heures Chapitres harmonisés des Pharmacopées Transférer l ? inoculum à la surface du milieu pré-coulé BM ou BM ou du milieu préparé en ? ? bo? tes Etaler l ? inoculum en surface à l ? aide d ? un étaleur stérile Incuber à - C pendant heures à heures ? Ensemencement En surface ? Incubation h à h à - C Rue des Quarante Mines ?? ZAC de Ther ?? Allonne ?? B P ?? Beauvais Cedex ?? France Tél ?? Fax ?? www biokar-diagnostics fr Page sur CNotes Pour la préparation des souches de référence incuber à - C pendant jours à jours selon la souche Pour d ? autres utilisations se reporter au référentiel en vigueur LECTURE Après incubation observer la croissance bactérienne Dénombrer les bo? tes contenant un nombre de colonies inférieur à Faire les observations microscopiques et les tests spéci ?ques appropriés pour con ?rmer les résultats FORMULE-TYPE Cette formule-type peut