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Pos ag hbe CERIMED ANALYSES BIOMEDICALES PROCÉDURE DE REALISATION Pages DE L ? Ag HBe Applicable le Code P Version Sign val Nom Rédigé par JOFACK BERTHOL Véri ?é par MBEP Christian Validé par Dr ATEBA Ghislaine Date Signatures OBJECTIFS ET PORTÉE a Object

CERIMED ANALYSES BIOMEDICALES PROCÉDURE DE REALISATION Pages DE L ? Ag HBe Applicable le Code P Version Sign val Nom Rédigé par JOFACK BERTHOL Véri ?é par MBEP Christian Validé par Dr ATEBA Ghislaine Date Signatures OBJECTIFS ET PORTÉE a Objectif La réalisation du test de l ? antigène HBe permet de déterminer si le virus de l ? hépatite B présent chez un patient est en phase de multiplication b Personnes concernées Personnel de l ? unité des ELISA Domaine d ? application Unité des ELISA RÉFÉRENCES Fiche d ? utilisation du réactif antigène HBe KITE MELSIN TACHES AUTORISATIONS ET RESPONSABILITÉS T? ches Réalisation du test Validation du test Personnes autorisées Responsables Personnels de l ? unité des ELISA JOFACK BERTHOL Personnels de l ? unité des ELISA MBEP Christian et le responsable technique CCERIMED ANALYSES BIOMEDICALES PROCÉDURE DE REALISATION DE Pages L ? Ag HBe Applicable le Code P Version Sign val PRINCIPE Le principe du dosage de l ? antigène HBe repose sur la méthode ELISA sandwich Les anticorps spéci ?que sont ?xé au font des puits l ? ajout du sérum ou du plasma et l ? ajout du conjugué permet la formation d ? un complexe immun après une période d ? incubation les éléments non ?xés sont retirer par lavage puis l ? ajout du substrat TMB et en ?n une solution stop est ajouté pour l ? arrêt de la réaction avec formation d ? une coloration jaune L ? intensité de la coloration est proportionnelle à la concentration des anticorps présent dans le sérum PROTOCOL DE REALISATION DU TEST ?? PREPARATION DE LA SOLUTION DE LAVAGE Elle se fait en diluant la solution Wash bu ?er avec de l ? eau distillée Multiplier la concentration du Wash bu ?er avec le volume total du acon pour avoir le volume total d ? eau distillée à utiliser NB laisser les réactifs à température ambiante pendant min au minimum avant l ? utilisation ?? MODE OPERATOIRE Ajouter ul CN CP et Echantillon sauf le blanc - Ajouter ul du HRP conjugué dans les puits sauf le blanc mixé en tapotant la plaque doucement - Incuber min à c - Laver fois avec la solution de lavage régler le combis Wash à - ul de solution par puits - Ajouter ul de Chromogène A et ul de chromogène B incubé min à c à l ? abri de la lumière - Ajouter ul du Stop et mixer gentiment - Lire à nm de densité optique pendant les min qui suivent l ? ajout du stop Si les puits sont doublés ou triplé toujours faire la moyenne des DO pour avoir la DO ?nale Interprétation des résultats méthode qualitatifs Cutt-o ? CO MCN X Si DO P CO ? NEGATIVE Si DO P CO ?? ? refaire le test en doublant les puits du patient ? ? ? et si même résultat est observé - considéré POSITVE Si DO P CO ? NEGATIVE CCERIMED ANALYSES BIOMEDICALES