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. Devant le Jury : Président: Mr Khéroua Omar Professeur Université d’Oran Dire

. Devant le Jury : Président: Mr Khéroua Omar Professeur Université d’Oran Directeur de thèse: Mr Saidi Djamel Professeur Université d’Oran Examinateur: Mr Benali Mohamed Professeur Université de Sidi Bel-Abbes Examinateur: Mme Merzouk Haféda Professeur Université de Tlemcen Examinateur: Mr Riazi Ali Professeur Université de Mostaganem Examinateur: Mr Slimani Miloud Professeur Université d’Oran Evaluation du risque toxicologique du colorant alimentaire tartrazine, à court terme chez la souris swiss. Faculté des Sciences, Département de Biologie آﻠﻴﺔ اﻟﻌﻠﻮم Thèse de Doctorat Option : Physiologie de la Nutrition et Sécurité Alimentaire Présenté par Sous la direction Mme Houdjedj Nabila Mr Saidi Djamel Née Mehedi Année universitaire 2011/2012 Avant Propos Tout d’abord, je remercie Dieu de m’avoir donné la santé, le courage et la patience et de m’avoir mis sur le chemin du savoir. Le travail présenté dans cette thèse de doctorat a été effectué au laboratoire de Physiologie de la Nutrition et Sécurité Alimentaire du Département de Biologie, Faculté des Sciences de l’Université d’Oran, sous la direction de Mr Saidi Djamel, Professeur de Physiologie. Je tiens avant tout à exprimer ma sincère gratitude aux Professeurs Saidi Djamel et Khéroua Omar qui m’ont accueillie au sein de leur laboratoire, il y a de cela de nombreuses années. Ils m’ont permis de me former à la recherche en débutant par le mémoire de Magister puis en me donnant l’opportunité de continuer par une thèse au sein de leur équipe. Je les remercie pour leur compétence scientifique et leur disponibilité. J’exprime ma sincère gratitude également au Pr Saidi Djamel d’avoir accepté d’être le rapporteur de ma thèse, pour son soutien et son aide. Merci au Pr Khéroua Omar d’avoir accepter la présidence du jury de cette thèse, ainsi qu’à l’intérêt qu’il a porté à ce travail. Je remercie vivement les Professeurs Merzouk Haféda, Slimani Miloud, Benali Mohamed, et Riazi Ali d’avoir si gentiment accepté la lourde tache d’examiner ce travail. J’adresse mes sincères remerciements au Pr Bourouis et au Dr Mered, spécialistes en anatomie pathologie, pour m’avoir aidée dans l’interprétation des résultats histologiques. Je ne saurai oublier tous ceux qui m’ont apporté leurs savoir faire, leurs compétences techniques et leur expérience si nécessaires dans la réalisation et le développement de ce travail. Je remercie tout particulièrement Melle Zaoui Chaheinez, qui, pendant toutes ces années, m’a épaulée; un grand merci pour ta gentillesse, pour ton soutien chaleureux et tes encouragements. Mes remerciements vont aussi à Melle Hachlef Wahiba, Mr El Mecherfi Kamel, Mme Youcef Narimèn, Mme Belarbi Hanane, Mme Taleb-Dida Nawel, Melle Mahdad Nadia et Melle Louala Sabrine qui, par leur aide, ont contribué à la réalisation de ce travail. Que mon amie Melle Kaddouri Hanane, qui n’a cessé de me prodiguer conseils et discussions scientifiques, trouve ici l’expression de ma vive reconnaissance. Ma reconnaissance va également à tous mes collègues qui par leur bonne humeur m’ont aidé à mener à bien ce travail : Mme Bennounan Samia, Melle Bouderbala Chahrazed, Melle Dib Wafaa, Mme Benazza Mounia, Mme Kerraz Djazia, Melle Boukortt Farida, Melle Ait Hamadouche Nadia, Mr Chekroun Abdallah, Mr Mezmaze Fateh, Mr Khaled Naamane, Mr Bensahla Ahmed, Mr Hamou Habib et Mr Boualga Ahmed. Je remercie également mes étudiants : Mme Haddi Soraya, Melle Mokrane Nawel, Mr Alami Omar, Melle Guendouz Malika et Melle Abdellaoui Amina qui sont passés par le laboratoire et qui m’ont apporté une aide précieuse tout le long de la réalisation de cette thèse. J’adresse à mes parents, à mon beau père et à mon mari un «merci», tout particulier pour toutes ces années de sacrifices. Je ne saurais oublier l’amie de mon enfance, Mme Benaouran Hakima qui est toujours présente et qui a su m’encourager et me soutenir au cours des différentes situations de ma vie. Résumé La tartrazine (E102) est un colorant alimentaire synthétique largement utilisé dans les produits alimentaires, les cosmétiques et les médicaments. Le potentiel toxique de ce xénobiotique n’est pas clairement établi. Le but de notre travail est l’étude des effets de la consommation subchronique de ce colorant aux doses de 0,1, 0,45, 1 et 2,5% sur les paramètres hématologiques et biochimiques sériques, sur la fertilité et sur la structure histologique de certains organes chez la souris Swiss. Pour l’étude, les animaux sont répartis en 5 groupes expérimentaux comprenant chacun 12 mâles et 12 femelles âgées de 4 semaines et pesant en moyenne (18±3) g. Pendant 13 semaines d’expérience, les groupes expérimentaux ont un libre accès à l’aliment et reçoivent respectivement de la tartrazine dans de l’eau de boisson aux doses de 0,1%, 0,45%, 1% et 2,5% par rapport au groupe témoin. Chaque jour, ont été relevés pour chaque groupe, la consommation de l’aliment et des liquides, les taux de mortalité, les transformations morphologiques et comportementales tandis que le poids corporel est noté à la fin de chaque semaine. Au terme des 13 semaines d’expérience, le sang est recueilli et après sacrifice, les reins, le foie, le cœur, la rate, le cerveau, les poumons, le thymus, la vessie, les glandes salivaires et les glandes surrénales chez les animaux des deux sexes, en plus de l’utérus et des ovaires chez les femelles et des testicules, des épididymes et des vésicules séminales chez les mâles sont prélevés. La fonction reproductrice a été étudiée sur 50 souris mâles par le test de fertilité, le comptage des spermatozoïdes testiculaires et épididymaires ainsi que par l’analyse de la mobilité et la morphologie des spermatozoïdes et l’histologie des testicules. De même, une étude histologique a été effectuée aussi sur le foie, les reins, le cerveau, la rate, le jéjunum, les ovaires et l’utérus pour vérifier l’existence d’éventuelles altérations. Les résultats obtenus indiquent que: - Une agressivité remarquable a été notée chez les mâles du groupe traités à 1 et 2,5%. - le gain pondéral est diminué significativement par rapport aux témoins chez tous les groupes de femelles traitées mais aussi chez les mâles traités à 2,5%. - Les souris mâles du groupe à 2,5% présentent une augmentation significative (p<0,05) du taux des globules rouges, de l’hémoglobine et de l’hématocrite. Cependant, une diminution très significative (p<0,001) du taux des globules blancs a été observée chez les mâles et les femelles du même groupe. - Les dosages biochimiques indiquent une diminution des protéines totales chez les mâles et les femelles du groupe à 0,1, 0,45 et 1% (p<0,01) ainsi qu’une hypoglycémie chez les mâles et les femelles du groupe à 2,5% (p<0,01). Cependant, une hyperglycémie est notée chez les femelles du groupe à 0,45% de tartrazine (p<0,01) par rapport au témoin. En revanche, une augmentation significative de l’albumine (p<0,001) est observée chez tous les groupes expérimentaux. De même, une augmentation significative de la bilirubine totale (p<0,05), de l’urée (p<0,001), de la créatinine (p<0,05), de l’acide urique (p<0,01), des transaminases (p<0,01), de la phosphatase alcaline (p<0,01), de la ץGT (p<0,01) est notée chez les mâles et les femelles du groupe 2,5%. Cependant, une augmentation significative (p<0,01) des triglycérides a été constatée chez les femelles du groupe à 2,5% et les mâles du groupe 1%. Par contre, celle du cholestérol est observée seulement chez les mâles du groupe à 2,5% (p<0,05). - L’analyse de la fonction reproductrice montre une diminution significative de l’index de fertilité (p<0,01), du nombre des spermatozoïdes au niveau des testicules et des épididymes (p<0,001), une diminution de la mobilité des spermatozoïdes (p<0,01), une augmentation des anomalies morphologiques (p<0,01) ainsi qu’une altération de la structure histologique des testicules chez les mâles du groupe traité à 2,5% de tartrazine. Le poids des nouveau-nés issus de tous les groupes traités est diminué (p<0,05) ainsi que la taille des nouveau-nés issus des groupes mâles traités à 0,45, 1 et 2,5% (p<0,01) pendant la période de la lactation. Seule, la mobilité des spermatozoïdes et l’architecture des testicules sont altérées chez les mâles traités à 1%. - Les résultats de l’étude histologique révèlent une dégénérescence hydropique au niveau du foie, une insuffisance chronique au niveau des reins, des œdèmes au niveau du cerveau, des dystrophies au niveau de la rate et une jéjunite chronique active au niveau du jéjunum associée à une atrophie villositaire partielle chez les femelles. En plus, une hyperplasie cellulaire a été observée dans certains organes comme le cerveau (hyperplasie gliales) et l’intestin (hyperplasie des cellules immunitaires) chez les mâles et les femelles du groupe traité à 2,5% de tartrazine. Une altération de la structure histologique du foie, des reins et de l’intestin a été constatée également pour les groupes traités à 0,45% et 1% de tartrazine chez les deux sexes. En conclusion, Les résultats obtenus indiquent que l’ingestion subchronique de tartrazine au delà de la DJA semble provoquer une perturbation du comportement des animaux, du gain pondéral, des paramètres hématologiques, des paramètres biochimiques sériques témoignant d’un dysfonctionnement hépatique et rénal ainsi qu’une altération de la fonction de reproduction et de l’architecture du foie, des reins, du cerveau, de la rate et du jéjunum chez la souris Swiss. La dose de 0,1% semble être sans effet dans notre modèle expérimental. Mots clés: Tartrazine, toxicité subchronique, FNS, fonction hépatique, fonction rénale, fertilité, structures histologiques, souris. Abstract uploads/Geographie/ 13201118t-pdf.pdf