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Candidoses : diagnostic biologique A) Diagnostic mycologique 1) Prélèvement - M

Candidoses : diagnostic biologique A) Diagnostic mycologique 1) Prélèvement - Muqueuses et lésions suintantes : prélèvement avec un écouvillon stérile humidifié - Lésions squameuses : gratter par un vaccinostyle - Ongles : racler sous le bourrelet du péri-onyxis - Liquides pathogènes et biopsies : acheminer dans un flacon stérile sans milieu de transport particulier. 2) Examen direct Il doit être réalisé assez rapidement après le prélèvement (les levures prolifèrent à température ambiante) - Eclaircissement : réalisé avec de la potasse (KOH) : uniquement pour les squames et les ongles 1 - Coloration : l’observation au microscope se fait soit directement à l’état frais entre lame et lamelle soit après coloration : bleu lactique, gram, MGG, bleu de méthylène, Gomori-Grocott … - Observations : les levures peuvent apparaître sous forme de blastospore (forme ovale de 2-4µm +/- bourgeonnement), de pseudomycélium ou de mycélium 3) Culture - Milieu de Sabouraud + antibiotique (gentamicine, chloramphénicol pour inhiber les contaminations bactériennes). Candida albicans pousse sur milieu Sabouraud chloramphénicol actidione (mais d’autres espèces de Candida sont inhibées par l’actidione). - Milieu chromogène : permet d’identifier C. albicans directement à la couleur de la colonie (pour les autres levures, des examens complémentaires sont nécessaires pour identifier l’espèce en cause) - Milieu pauvre : RAT, PCB (pomme de terre, carotte, bile) : permettent d’observer les formes pseudomycélium Incubation à 25-30°C (éventuellement 37°C pour les prélèvements profonds) C. albicans : développement en 24-48H de colonies d’1-2mm de diamètre, crémeuses, blanchâtre 4) Autres tests d’identification - Test de blastèse : étude de la filamentation - Recherche de chlamydospores - Détection antigénique : technique d’agglutination (particules de latex sensibilisée par de anticorps monoclonaux B) Sérologie Utilisé pour le diagnostic ou la surveillance des candidoses profondes. - détection des Ac : il faut tenir compte du titre, des arcs de précipitation … - détection des Ag circulants : détection d’Ag mannanes (peu être intéressant chez l’immunodéprimé où la détection d’Ac peut être difficile d’interprétation) C) PCR D) Anti-fongigramme 2 Un antifongigramme peut être réalisé dans le cadre d'un échec thérapeutique. Des CMI peuvent être mesurées par la technique des E-test 3 4 uploads/Geographie/ candidoses-diagnostic-biologique.pdf