Remerciez-le!

Remerciez @Admin pour avoir partagé cet document gratuitement, de la manière la plus simple, en partageant sur les réseaux sociaux.

Micropropagation of adult avocado Résumé Une procédure a été mise au point pour

Micropropagation of adult avocado Résumé Une procédure a été mise au point pour micropropager avec succès la sélection IV-8, un porte-greffe d'avocat adulte. Les cultures ont été initiées à partir de pousses basales obtenues après la taille d'un arbre jusqu'au niveau du sol. Les bourgeons ont germé dans un milieu solide de Murashige et Skoog avec des macroéléments à demi-force et un supplément de benzyladénine 1,3 μM. Pour induire la prolifération, les pousses ont été cultivées pendant 2 semaines en milieu liquide dans un rollordrum avec la formulation de sel de Gamborg et de la benzyladénine 1.3 μM, suivies de 6 semaines dans des conditions de double phase (milieu solide avec une couche de milieu liquide sur le dessus) en utilisant la même formulation de sel et deux suppléments de benzyladénine différents, 2.8 μM en phase solide et 0.4 μM en phase liquide. Quatre-vingt-dix pour cent des pousses sont enracinées après une culture de 3 jours en milieu liquide dans un rollordrum avec des macro-éléments MS à 0,3× et 4,9 μM d'acide indolebutyrique, suivie d'un transfert en milieu solide en l'absence d'auxine mais avec 1 g l-1 de charbon actif. Le taux de survie pendant l'acclimatation en serre était de 70 %. Abréviations : BA - benzyladénine ; IBA - acide indolebutyrique ; MS - Murashige & Skoog Introduction L'avocat est une espèce très hétérozygote et l'utilisation de porte-greffes de semis entraîne une grande variabilité dans le comportement au champ ; par exemple, la résistance au stress biotique et abi- otique et la productivité des arbres individuels (Ben Ya'acov, 1987). Actuellement, les génotypes sélectionnés peuvent être multipliés par voie végétative en utilisant la technique de Frolich (Frolich et Platt, 1972), qui consiste à greffer le matériel à enraciner sur un semis nourricier, puis à étioler la partie inférieure du scion en croissance. Les racines émergent à la base étiolée de la pousse greffée. Cette méthode est coûteuse et son applicabilité dépend du type de génotype (Fernández-Galván et Galán-Sauco, 1987). Il est donc souhaitable de développer des méthodes de multiplication végétative pour l'avocat. La culture in vitro a donné des résultats positifs lorsque du matériel juvénile était utilisé (Cooper, 1987 ; Barceló-Muñoz et al., 1990) ; cependant, les réponses obtenues avec des explants adultes étaient médiocres (Cooper, 1987 ; Pliego-Alfaro et al., 1987). Cette in- a été entreprise pour développer une méthode de micropropagation de l'avocat adulte. Matériels et méthodes Un arbre de 10 ans d'un verger en pleine production, situé à la station expérimentale de La Mayora (Malaga) a été choisi. Cet arbre était une combinaison du cul- tivar Hass (scion) et d'un semis mexicain (IV-8) comme porte-greffe, et avait été sélectionné en raison de sa production élevée et de son faible indice de croissance bisannuelle sur une période de 4 ans (Pliego-Alfaro et al., 1987). Initiation des cultures L'arbre a été taillé jusqu'au niveau du sol et les pousses issues de la partie basale du porte-greffe ont été utilisées pour l'établissement de la culture. Après l'enlèvement des feuilles, les pousses de 20 à 25 cm de long ont été désinfectées dans une solution d'hypoclorite de sodium à 0,5 % avec quelques gouttes de Entre 20 et 10 min. Ensuite, ils ont été lavés à l'eau et divisés en sections nodales de 1 à 1,5 cm de long avec un bourgeon latéral. Selon la taille du bourgeon, deux à quatre feuilles ont été enlevées. Ensuite, ces explants ont été à nouveau désinfectés pendant 10 minutes et lavés trois fois à l'eau stérile avant d'être mis en culture dans des tubes à essai. Un milieu MS modifié (Murashige et Skoog, 1962), avec des macro-éléments à demi-force (MS 0,5×) et un supplément de 1,3 μM BA, solidifié avec de la gélose A-1296 (Sigma Chemical) à 6 g l-1, a été utilisé pour l'initiation de la culture (Pliego-Alfaro et al., 1987). Une réplique du porte-greffe IV-8 a été obtenue en utilisant la technique de Frolich (Frolich et Platt, 1972) et plantée sur le terrain. Après la floraison de cet arbre, des sections nodales de pousses en croissance active de l'up par partie de l'arbre ont été établies in vitro en suivant la procédure indiquée ci-dessus ; bien que dans ce cas, la formulation de sel de Gamborg (Gamborg, 1966) ait été utilisée au lieu du mélange de base modifié MS. Des sections nodales avec des bourgeons latéraux provenant des pousses basales de l'arbre élagué original, IV-8, ont également été établies dans ce milieu pour servir de témoins. Multiplication des tirs Toutes les expériences ont été réalisées avec du matériel provenant des pousses basales de l'arbre taillé. En utilisant des pousses de 1,5 cm de long qui avaient germé des sections nodales sur le milieu d'initiation, un stock proliférant dans un milieu à double phase a été établi selon la procédure de Pliego-Alfaro et al. (1987). Le milieu à double phase comportait une phase solide inférieure et une phase liquide superposée. La phase solide contenait du MS medium avec des macroéléments à la moitié de leur concentration et 2,8 μM BA, tandis que la phase liquide avait la même composition mais la concentration en BA était de 0,4 μM. Après une sous-culture, des pousses apicales de 1 cm de long ou des sections nodales avec des bourgeons latéraux obtenus à partir de ce stock, ont été utilisées pour étudier l'effet, sur la réactivation de la croissance des bourgeons, de la culture en milieu liquide dans un rollordrum (5 tr/min). Les effets de différentes concentrations de BA (0-1,3 μM) en tant que compléments au milieu MS avec des macro- éléments à demi-force ont été évalués. Dans la seconde expérience, l'effet d'un autre système de culture, par exemple la culture en milieu liquide dans un tambour (2 semaines), suivie d'une culture en conditions de double phase (4 semaines), sur la prolifération des pousses a été évalué. La culture en continu dans des conditions à double phase a été utilisée comme contrôle. Après cette expérience, les effets sur les pousses de qualité variable, de 4 à 8 semaines, dans des conditions de double phase ont été évaluées. Enfin, une expérience a été menée pour tester les effets de différentes formulations de sel, c'est-à-dire la MS avec des macro-éléments à demi-force ou le mélange de sel de Gamborg (Gamborg, 1966) sur la prolifération des pousses. Dans tous les cas, les ajouts organiques étaient ceux de la MS moyenne. Les effets de deux cytokinines, la zéatine et la BA, ont été évalués. Dans cette expérience, le système de culture était de 2 semaines en milieu liquide dans un rollordrum, suivies de 6 semaines en milieu à double phase. Dans le milieu liquide (rollordrum), la concentration de cytokinine était de 1,3 μM, tandis que dans la double phase, les concentrations de cytokinine étaient de 2,8 et 0,4 μM dans les milieux solide et liquide, respectivement. Enracinement et acclimatation des pousses La procédure d'enracinement standard utilisée est celle développée par Barceló-Muñoz et al. (1990) pour les avocats juvéniles ; par exemple, des pousses de 1,5 à 2 cm de long ont été incubées pendant 3 jours dans un milieu MS solide avec des macro-éléments à un tiers et 4,9 μM IBA. Ensuite, elles ont été transférées dans le même milieu sans auxine mais avec 1 g l-1 de charbon actif (Sigma Chemical). Afin d'optimiser l'enracinement, les effets de la culture des pousses en milieu liquide dans le rollordrum (5 tr/min) pendant la première (avec auxine) ou la deuxième (sans auxine) phase du processus d'enracinement ont été étudiés. Le matériel pour cette expérience a été obtenu à partir d'un stock proliférant avec la méthode alternative utilisant la formulation modifiée de sel MS et la BA comme cytokinine (1,3 μM en milieu liquide dans le rollordrum, 2,8 et 0,4 μM dans les milieux solides et liquides, respectivement, de la double phase). A second experiment was carried out to test the effect of the salt formulation used in the multiplica- tion medium, MS 0.5× or Gamborg, on the rooting capacity of the shoots. Material had been multiplied using the alternate method, with BA as cytokinin. In this experiment, liquid medium was used during the first stage of the rooting process (3 days). Over 300 shoots were used per treatment. Finally, the rooting capacity of shoots derived from the clonal tree obtained by the Frolich technique (Fro- lich and Platt, 1972), in relation to shoots obtained from the pruned tree, was evaluated. In this experi- ment, liquid medium was used during the first part (3 days with auxin) of the rooting process. The mater- ial was obtained from nodal sections with lateral buds qui avait germé dans le milieu d'initiation de la culture avec le mélange de sel de Gamborg (Gamborg, 1966). Les plantes enracinées in vitro ont été transplantées sur des plateaux avec des cellules de 3×3×5,5 cm avec du sustrat de racine De Baat Spec Mixt 20/80 (Coevorden, Hollande) et maintenues pendant 4 semaines sous des tunnels en polyéthylène avec une humidité relative de 100 % et une irradiance de 110-120 μmol m-2 uploads/Geographie/ micropropagation-of-adult-avocado-mo.pdf