Remerciez-le!

Remerciez @Admin pour avoir partagé cet document gratuitement, de la manière la plus simple, en partageant sur les réseaux sociaux.

1/1 Association Générale des Laboratoires d’Analyse de l’Environnement Organism

1/1 Association Générale des Laboratoires d’Analyse de l’Environnement Organisme accrédité d’Essais Interlaboratoires dans le domaine de l’analyse de l’environnement (Portées communiquées sur demande) Association loi 1901 à but non lucratif, déclarée en Préfecture du Nord (59) n° 5/28900, et parue au J.O. du 13 /4/1994 (126 e année n°15) – SIRET 397 997 594 00023 - APE 743B. Adresse postale : 24, boulevard Jean-Baptiste Lebas 59000 LILLE Tél : 03 20 16 91 40 Fax : 03 20 16 91 40 @ : aglae@nordnet.fr Lille, le 17 février 2006 Vos Réf. : - Nos Réf. : C/PG/PG/06021475 Objet : Projet de norme « incertitude de mesure » version du 17/02/06 Chère Madame, Cher Monsieur, En vue de notre réunion du mardi 21 mars 2006, je vous prie de trouver la dernière version de notre projet de norme relative à l’estimation de l’incertitude de mesure dans le domaine de l’analyse microbiologique de l’eau. Comme vous pourrez le constater, la rédaction du document avance rapidement. Certes, certaines parties restent à rédiger et d’autres à améliorer (notamment l’annexe C), mais l’ensemble prend forme. D’ici le 21 mars, des modifications et compléments seront encore apportés. Je vous les communiquerai dès que possible. Je vous souhaite bonne lecture et vous invite à faire parvenir vos questions éventuelles à Madame Thomas. Le Directeur d’AGLAE, Philippe Guarini PS : Les numéros de page indiqués dans le sommaire ne sont pas justes (ne pas en tenir compte); la numérotation des annexes ne démarre pas sur « A » (en revanche, les renvois dans le texte sont justes). AFNOR Membres de la Commission T90D Norme incertitude microbio. - version du 17/02/06 1/37 Eaux – Microbiologie Qualité de l'eau Protocole d'estimation de l'incertitude de mesure associée à un résultat d'analyse pour les méthodes de dénombrement microbiologiques Correspondance A la date de publication du présent document, il n'existe pas de travaux européens ou internationaux traitant de ce même sujet. Analyse Le présent document fournit un protocole pour estimer l'incertitude de mesure associée à un résultat d'analyse microbiologique. Ce document ne s'applique pas à l'évaluation de l’incertitude de mesure pour les méthodes de dénombrement indirect (notamment les méthodes dites « rapides ») ni pour les méthodes de recherche qualitative (présence/absence). Descripteurs Thésaurus International Technique: eau, essai des eaux, analyse microbiologique, test statistique Modifications Corrections Avant-propos national Références aux normes françaises La correspondance entre les normes mentionnées à l’article «Références normatives» et les normes françaises identiques est la suivante : ISO/TR 13843:2000 : FD ENV ISO 13843 (indice de classement : T 90-460) ISO 3534-1 : NF ISO 3534-1 (indice de classement : X 06-002-1) ISO 5725-1 : NF ISO 5725-1 (indice de classement : X 06-041-1) ISO/TS 21748:2004 : FD ISO/TS 21748 (indice de classement : X 06-067) Norme incertitude microbio. - version du 17/02/06 2/37 Sommaire Page Introduction 3/ 1 Domaine d'application 4/ 2 Références normatives 4/ 3 Définitions et symboles 4/ 3.1 Définitions d’ordre général 4/ 3.2 Définitions répondant plus spécifiquement aux besoins de la présente norme 6/ 3.3 Définitions et symboles statistiques 6/ 4 Considérations préliminaires 8/ 4.1 Méthode microbiologique validée 8/ 4.2 Méthode sous contrôle qualité 8/ 4.3 Pré-requis pour l’application de la présente norme 9/ 5 Méthodologie 9/ 5.1 Rédaction d’un dossier d’estimation de l’incertitude 9/ 5.2 Identifier et décrire la méthode de dénombrement 10/ 5.3 Lister les facteurs sources de variabilité 10/ 5.4 Réaliser l’approche quantitative de l’incertitude de mesure 11/ 6 Mise en œuvre pratique de l’approche globale 14/ 6.1 Recherche de l’expression de CV Poisson 2 14/ 6.2 Exploitation des cartes de contrôle 15/ 6.3 Collecte des données disponibles auprès des organisateurs d’essais interlaboratoires 20/ 6.4 Annexe C Principaux paramètres microbiologiques de l’analyse de l’environnement Annexe D Exemple de dossier d’estimation de l’incertitude Annexe E Table des fractiles de la loi du 2 χ : 2 ; p ddl χ Bibliographie Norme incertitude microbio. - version du 17/02/06 3/37 Avant propos La microbiologie de l’environnement est une microbiologie quantitative : pour la prévention d’épidémies en particulier, le problème n’est pas uniquement de savoir s’il y a présence de germes dans l’eau, mais de savoir combien ; ceci pour évaluer les risques et prendre les décisions appropriées par comparaison entre le résultat et une limite réglementaire. La pertinence de cette comparaison nécessite que l’incertitude soit prise en compte. La norme NF EN ISO/CEI 17025 demande d’ailleurs d’évaluer l’incertitude de mesure dans les laboratoires d’analyses. Mais cette question ne concerne pas que les laboratoires. C’est l’affaire de tous les intervenants et un accord entre client et fournisseur est nécessaire. Ainsi, tout donneur d’ordre devrait clairement spécifier ses attentes dans ce domaine. Un autre intervenant, le législateur, doit préciser explicitement s’il a inclus l’incertitude de mesure dans le facteur de sécurité qui détermine la valeur réglementaire, auquel cas il n’y a plus lieu de le reprendre en compte au moment de la décision de gestion. C’est encore plus clair si le législateur écrit « en aucun cas le résultat de dénombrement ne doit dépasser n germes dans les x ml analysés ». Le caractère particulaire des microorganismes et leur répartition aléatoire même dans des eaux parfaitement homogénéisées, obligent à des considérations statistiques et limitent inexorablement la précision des dénombrements. Aussi, de manière à réduire l’incertitude le client devra parfois envisager de faire réaliser plusieurs mesures. En effet, dans certains cas l’estimation statistique ne permet pas de prendre de décision parce que la différence avec la valeur réglementaire n’est pas significative. La réalisation de mesures répétées ou de séries de mesures permet alors d’affiner l’estimation de la concentration microbienne. Dans d’autres cas, c’est un biais, ou écart à la valeur vraie, qui est redouté (par exemple interférence de certains éléments de la microflore de l’échantillon sur le mesurande) et là encore des mesures répétées sont nécessaires, mais en modifiant la méthode ou en associant plusieurs laboratoires. A l’incertitude au sens restreint (précision), s’ajoute enfin une incertitude (au sens commun) qui peut être largement prépondérante et consiste en biais. En effet, les microorganismes présentent dans les eaux différents états physiologiques (cultivables, stressés, revivifiables, … surtout dans les eaux oligotrophes ou désinfectées) qu’il faut distinguer sous peine de biais importants. Norme incertitude microbio. - version du 17/02/06 4/37 Introduction L’objet de la présente norme est de fixer la démarche à suivre pour procéder à l’évaluation de l’incertitude de mesure dans le domaine de l’analyse microbiologique de l’eau. Avant de décrire les modalités du travail à accomplir, il convient de rappeler plusieurs points : Tout d’abord, l’analyse microbiologique classique se démarque de l’analyse chimique par le fait qu’il s’agit d’un dénombrement. Il en résulte que la représentation de la dispersion des données dans ce domaine nécessite d’utiliser des lois statistiques spécifiques, différentes de celles appliquées en chimie : loi de Poisson et loi binomiale négative au lieu de la loi normale. Par ailleurs, l’analyse microbiologique pour les besoins du contrôle sanitaire ou de la police des eaux s’inscrit dans un contexte réglementaire où les limites de qualité sont le plus souvent du type « absence de germes dans la prise d’essai analysée ». Tout l’enjeu de traiter cette question de l’incertitude de mesure réside donc le plus souvent dans l’évaluation d’une limite de détection objective. Enfin, connaître l’incertitude de mesure c’est pouvoir substituer a priori à un résultat observé l’intervalle de confiance sur lequel la valeur vraie du paramètre a toutes les chances de se trouver (au seuil de confiance de 95% ou 99% généralement). Il s’agit donc de ne pas s’en tenir à connaître la fidélité du dénombrement (étroitesse de l’accord de mesures répétées sur un même matériau) ainsi que ses fluctuations sur la gamme de travail de la méthode, mais bien d’en déduire les limites de confiance liées à l’observation d’un résultat donné. Ceci intégrant autant que faire se peut les biais et l’état physiologique des microorganismes ciblés par l’analyse. Compte tenu de ces éléments, seule la méthodologie décrite dans la norme ISO/TR 13843:2000 permet aujourd’hui d’apporter une réponse complète et constructive à la problématique posée. La présente norme s’appuie donc largement sur ce texte normatif, en particulier pour l’exploitation statistique des données expérimentales. Norme incertitude microbio. - version du 17/02/06 5/37 1. Domaine d'application Les définitions et procédures de travail décrites dans le présent document s’appliquent à toute méthode de dénombrement de microorganismes dans les eaux, qu’elle soit de type énumératif (comptage de colonies sur boîtes de Petri) ou de type quantique (technique dite du «Nombre le Plus Probable»). Elles peuvent également être appliquées à d’autres méthodes de comptage d’entités discrètes ; ceci dans le domaine de l’analyse microbiologique de l’environnement, voire d’autres secteurs d’activité. En revanche, la présente norme ne s’applique pas aux méthodes de recherche (résultat qualitatif, du type « présence/absence »). Elle ne s’applique pas d’emblée aux méthodes indirectes (ATP-métrie, PCR, impédance-métrie, …). 2. Références normatives Ce document comporte par référence datée ou non datée des dispositions d'autres publications. Pour les références datées, seule l'édition citée s'applique. Pour les références non datées, la dernière édition du document de référence s'applique (y compris les éventuels amendements). uploads/Management/ incertitude-microbio.pdf