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Laboratoire de l’Hôpital Ste Joséphine BAKHITA 13BP119 Tel: +228 70 47 06 62 PR

Laboratoire de l’Hôpital Ste Joséphine BAKHITA 13BP119 Tel: +228 70 47 06 62 PROCEDURE DU DOSAGE DE PROTEINE C REACTIVE ( CRP ) Code ID : POS-CCF-HSJB-01 Version : 01 Nombre de pages: 01 / 01 Date d’application : 22-08-2022 Création du document Nom Fonction Date et Signature Auteur(s) Surveillant du laboratoire Vérificateur(s) Responsable qualité Personne validant le document Surveillant du laboratoire Evolution du document Versio n Date d’application Modification faite par Modifications opérées par rapport à version précédente Laboratoire de l’Hôpital Ste Joséphine BAKHITA 13BP119 Tel: +228 70 47 06 62 PROCEDURE DU DOSAGE DE PROTEINE C REACTIVE ( CRP ) Code ID : POS-CCF-HSJB-01 Version : 01 Nombre de pages: 01 / 01 Date d’application : 22-08-2022 Table des matières 1- Objectifs et portée.......................................................................................................................3 2- Abréviations et définitions..........................................................................................................3 3- Tâches, autorisations et responsabilités......................................................................................3 4- Principe......................................................................................................................................3 5- Sécurité et environnement..........................................................................................................3 6- Échantillon :...............................................................................................................................4 7- Équipements et fournitures.........................................................................................................4 8- Réactifs et produits chimiques....................................................................................................4 9- Contrôle de la qualité..................................................................................................................4 10- Mode opératoire......................................................................................................................4 11- Valeurs de référence...............................................................................................................5 12- Interférences...........................................................................................................................5 13- Valeurs critiques.....................................................................................................................6 14- Formulaires connexes.............................................................................................................6 15- Références..............................................................................................................................6 16- Pièces jointes..........................................................................................................................6 Laboratoire de l’Hôpital Ste Joséphine BAKHITA 13BP119 Tel: +228 70 47 06 62 PROCEDURE DU DOSAGE DE PROTEINE C REACTIVE ( CRP ) Code ID : POS-CCF-HSJB-01 Version : 01 Nombre de pages: 01 / 01 Date d’application : 22-08-2022 1- Objectifs et portée cette procédure vise à décrire les différentes étapes du dosage de protéine c réactive ( crp ) dans le sang. 2- Abréviations et définitions CIQ : Contrôle Interne de Qualité SL : Surveillant du laboratoire RQ : Responsable Qualité CRP : protéine c réactive 3- Tâches, autorisations et responsabilités Tâche Autorisé Responsable Démarrage du spectrophotomètre et maintenance quotidienne RQ, SL SL Mesure à blanc RQ, SL SL Préparation des réactifs RQ, SL SL Préparation des sérums de contrôle RQ, SL SL Passage des contrôles et validation des contrôles RQ, SL SL Passage des échantillons RQ, SL SL Validation analytique RQ, SL SL 4- Principe Le test CRP est un test qualitatif et semi-quantitatif d'agglutination sur lame. Lorsque le réactif contient des anticorps contre la CRP qui réagiront avec du sérum contenant de la CRP, provoquant une agglutination. 5- Sécurité et environnement - Utiliser les équipements de protection (Gant, blouse, lunettes) - Rincer abondamment à l’eau en cas de contact avec la peau ou les yeux. - Respect la procédure de tri et de gestion des déchets Par mesure de sécurité, tous échantillon doit être traité comme potentiellement infectieux Laboratoire de l’Hôpital Ste Joséphine BAKHITA 13BP119 Tel: +228 70 47 06 62 PROCEDURE DU DOSAGE DE PROTEINE C REACTIVE ( CRP ) Code ID : POS-CCF-HSJB-01 Version : 01 Nombre de pages: 01 / 01 Date d’application : 22-08-2022 6- Échantillon : Matériel Quantité minimale Stabilité Sérum 50 µl 7 jours 2 et 8° C 7- Équipements et fournitures Consommable Embouts jaune Tube à hémolyse Matériel et équipement : - Plaque test noire - Mélangeur spécial - Portoir pour tubes sérologiques - Micropipette - Latex réactif - Contrôle positif et contrôle négatif - NaCl 0,9% 8- Réactifs et produits chimiques Désignation Réactif Conditions de stockage Lieu de stockage Flacon latex Réactif de travail 2 à 8 ° C Réfrigérateur 2 - Préparation de la solution de travail : Réactif prêt à l’emploi - Stabilité et conservation : le réactif est stable jusqu’à la date de péremption inscrit sur le flacon du réactif latex à l’absence de contamination de 2 à 8 °C. 9- Contrôle de la qualité Faire au moins un contrôle de qualité ( contrôle positif, control négatif ) par 24 heures. Procédure de contrôle qualité 10- Mode opératoire o Enregistrement et étiquetage : Les échantillons sont enregistrés après avoir vérifié leurs conformités. o Centrifugation et décantation : Centrifuger à 4000 tours pendant 5 minutes puis décanter le sérum. o Préparation de la liste de travail : Faire la liste de travail o Ramener les réactifs à la température du Laboratoire o Préparation de la paillasse : Décontamination de la paillasse, disposition de matériel et équipement. Laboratoire de l’Hôpital Ste Joséphine BAKHITA 13BP119 Tel: +228 70 47 06 62 PROCEDURE DU DOSAGE DE PROTEINE C REACTIVE ( CRP ) Code ID : POS-CCF-HSJB-01 Version : 01 Nombre de pages: 01 / 01 Date d’application : 22-08-2022 o Mode operatoire 1 - Test qualitatif - Placer les réactifs et les échantillons à température ambiante - Ajouter 1 goutte ou 50 ul de contrôle négatif et positif sur la plaque test noir - Remettre en suspension (homogénéiser) lentement le réactif au latex - Ajouté 50 ul de Réactif au latex sur chaque goutte des contrôles - Homogénéiser et mélanger lentement - Lire la plaque noire à 100 tr/min pendant 1 minute 2 - Test semi-quantitatif - A l'aide d'une micropipette ajouter 50 ul de réactif au cercle noir de la Plaque test 1,2, 3, 4, 5,6 - Ajouter 50 ul de sérum sanguin du patient sur la plaque test noire à un numéro identifié - Homogénéiser uniformément - Lire la plaque noire à 100 tr/min pendant 1 minute 3 - Iinterprétation des résultats 1. Examen macroscopique d’agglutination en 1 minute a) Des résultats positifs Il y a agglutination avec CRP supérieur à 6 mg/ml b) Résultats négatifs Pas d'agglutination avec CRP < 6 mg/dl c) Valeur normale pour les adultes < 6 mg/dl 5. Les niveaux de CRP peuvent être calculés en multipliant la valeur de dilution la plus élevée avec une sensibilité de l'appareil de 6 mg/ml Dilution Mg/dl Néant 6 1/2 12 1/4 24 1/8 48 1/16 96 1/32 192 o Validation technique : Elle consiste à vérifier le bon déroulement des différentes phases de réalisation des analyses et surtout de la validité des CIQ. o Intervalle de mesure : 7 – 350 UI/l, diluer au 1/5 avec du sérum physiologique si la valeur est supérieur à 350 UI/l. Laboratoire de l’Hôpital Ste Joséphine BAKHITA 13BP119 Tel: +228 70 47 06 62 PROCEDURE DU DOSAGE DE PROTEINE C REACTIVE ( CRP ) Code ID : POS-CCF-HSJB-01 Version : 01 Nombre de pages: 01 / 01 Date d’application : 22-08-2022 4 Valeurs de référence Femme : ≤ 32 UI/I Homme : ≤ 40 UI/I 5 Interférences Hémoglobine : Pas d’interférence jusqu’à 0,48 g/dl Hémolyse : Interférence positive en raison de l’ALAT contenu dans les érythrocytes Bilirubine : Pas d’inférence jusqu’à 20 mg/l (342 µmol/l) Turbidité : Pas d’interférence jusqu’à 6,16 g/l (7 mmol/l) La LDH contenue dans le réactif permet pendant la phase de préincubation, de réduire la pyruvate endogène qui sinon produirait une interférence positive. Des taux élevés d’ALAT, peuvent conduire à une déplétion en NADH pendant la phase de préincubation, conduisant à des résultats erronés par défaut. Dans le cas de spécimens lipidiques ou ictériques, l’augmentation de l’absorbance du mélange réactionnel peu masquer ce phénomène. Il est recommandé de contrôler ces spécimens en diluant au 1/5 dans une solution du NaCl 9 g/l. 6 Valeurs critiques Sans objet 7 Formulaires connexes - Fiche de paillasse E5-48 - Fiche de gestion des CIQ : E5-29 , E5-30 8 Références - Normes ISO 15189 - Fiche technique du réactif du dosage de l’acide urique BIOLABO Ref : 80027, 80127. 9 Pièces jointes Fiche technique de la notice de réactif en cours d’utilisation uploads/Management/ procedure-du-dosage-crp.pdf