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RAPPORT DE STAGE d’Initiation : LES ANALYSES HEMATOLOGIQUES ET MICROBIOLOGIQUES

RAPPORT DE STAGE d’Initiation : LES ANALYSES HEMATOLOGIQUES ET MICROBIOLOGIQUES Université Sultan Moulay Slimane Ecole Supérieure de Technologie de Khénifra Filière Bioanalyses Médicales. Réalisé par : Encadrants pédagogiques : Mlle. KADIRI zineb Pr. Sanae Charroud Pr. Ainane Tarik Encadrant professionnelle : Dr. AHANOU abderrahman (Pharmacien Biologiste « Laboratoire Ahanou d’analyses médicales khénifra ») REMERCIEMENTS En premier lieu et avant tout, je prie Dieu de m’avoir donné la volonté et le courage d’achever mon stage . Je voudrais remercier toutes les personnes qui ont contribué de près ou de loin à la réalisation de ce travail. Tout d’abord, je tiens à remercier tout le personnel de laboratoire d’analyses médicales AHANOU, plus particulièrement Monsieur le biologiste Dr. AHANOU abderrahman de m’avoir accueilli durant cette période de stage au sein de son laboratoire, et de m’avoir fait confiance afin de réaliser ce stage dans les meilleures conditions possibles. Mes profonds remerciements s’adressent également à Pr. Charroud Sanae et Pr. AINANE Tarek, qui ont compris l’intérêt de ce travail m’en ont consacré beaucoup de leurs temps précieux afin de mener à bien ce travail. Je joins, ainsi, tous mes remerciements les plus chaleureux à toute l’équipe pédagogique de l’école supérieure de Technologie khénifra et tous les enseignants responsables de la formation de Bioanalyses Médicales, pour avoir assuré le suivi de la formation. Sans oublier, bien sûr, ma famille, mes amies et mes collègues de la promotion. Liste des tableaux Tableau 1: Les différents anticoagulants et tubes utilisés......................................................................6 Tableau 2: Les différents groupes sanguins selon l’absence et /ou la présence des antigènes et/ou des anticorps...............................................................................................................................................16 Liste des abréviations ABO Système ABO ALAT Alanine Amino Transférase ASAT Aspartate Amino Transférase ASLO Anitistreptolysines O BK Bacile de Koch CCMH Concentration Corpusculaire Moyenne en Hémoglobine CLED Cysteine lactose electrolyt deficient CRP Protéine C réactif ECBU Examen Cyto - Bactériologique des Urines EDTA Ethyléne Diamine Tétraacétique Acide GB Globule blanc HDL High Density Lipoprotein LCR Liquide céphalo rachidien LDL Low Density lipoprotein NFS Numération Formulaire Sanguin PN Polynucléaire PV Prélèvement vaginal RH Système rhesus TCA Temps De Céphaline Activée. TCK Temps de Céphaline Kaolin TCMH Teneur corpusculaire moyenne en hémoglobine TP Taux De Prothrombine. TPHA Tréponima Palludium Hémagglutination Assay VDRL Veneral Disease Research Laboratory VGM Volume globulaire moyen VS Vitesse De Sédimentation. Sommaire INTRODUCTION......................................................................................................................................1 I. PRESENTATION DU LIEU DE STAGE.................................................................................................3 1. Données générales sur Le laboratoire........................................................................................3 2. Organigramme............................................................................................................................3 II. DIFFERENTES UNITES DU LABORATOIRE........................................................................................3 1. Hématologie...............................................................................................................................4 2. Sérologie-Immunologie..............................................................................................................4 3. Biochimie....................................................................................................................................4 4. Microbiologie..............................................................................................................................4 1. La phase pré-analytique.............................................................................................................5 Accueil et prélèvement..............................................................................................................................5 La préparation d’échantillon pour l’analyse..............................................................................................7 2. La phase analytique....................................................................................................................7 3. La phase post-analytique...........................................................................................................7 I. LES ANALYSES HEMATOLOGIQUES ET MICROBILOGIQUES.............................................................9 1. La cytologie.................................................................................................................................9 La NFS 9 Le frottis sanguin.....................................................................................................................................13 La vitesse de sédimentation....................................................................................................................13 2. L’hémostase..........................................................................................................................14 3. Immuno-hématologie...............................................................................................................14 Le groupage sanguin (ABO - Rhésus).......................................................................................................15 1. L’examen cytobactériologique des urines (E.C.B.U).................................................................15 2. Examen cyto-bactériologique des sécrétions vaginales (PV)....................................................16 II. ETUDE DE CAS : DETAIL D’UNE SEULE TECHNIQUE………………………………….. ..17 CONCLUSION........................................................................................................................................19 1 INTRODUCTION j’ai effectué un stage au sein du laboratoire d’analyses médicales AHANOU à khenifra dont le principal objectif est d’appliquer le coté théorique, fortifier le coté pratique de la formation et d’améliorer mes compétences dans le domaine des analyses médicales. Le sujet de mon Projet consiste l’étude descriptive des analyses hématologiques et microbiologiques que l’on distingue classiquement comme des examens médicaux systématiques qui permettent une détection précoce, diagnostic et le suivi les effets d’un traitement et l’évolution d’une maladie . A travers ce rapport je vais essayer de présenter un aperçu sur le laboratoire, puis d’introduire les différentes tâches techniques des analyses hématologiques et microbiologiques effectuées au sein du laboratoire. Donc quelles sont les différents tests réalisés au niveau ces deux services ? PARTIE I : STAGE TECHNIQUE Page 3 Techniciens Secrétaires: Infirmiers: Technicien chef: Pharmacien biologiste: Dr. AHANOU abderrahmane Hématologie Sérologie-Immunologie Laboratoire Biochimie Microbiologie I. PRESENTATION DU LIEU DE STAGE 1. Données générales sur Le laboratoire  Nom : Laboratoire AHANOU d’analyses médicales.  Pharmacien biologiste : AHANOU abderrahman  Adresse : Hay hammou hassan , rue 2 , n°237 BIS KHENIFRA 2. Organigramme Figure 1: L’organigramme de laboratoire d’analyses médicales AHANOU II. DIFFERENTES UNITES DU LABORATOIRE Le laboratoire est constitué de quatre postes techniques différents : 1. Hématologie Les examens de base, habituellement sollicités, dans cette unité sont :  NFS (Numération Formule Sanguine) qui est un hémogramme complet ou formule sanguine.  VS (Vitesse de Sédimentation).  Hémostase (Temps de Céphaline Active « TCA » ou taux de Prothrombine « TP »).  Groupage sanguin (AB0-Rh). 2. Sérologie-Immunologie Une paillasse est dédicacée pour des tests, tels que :  Sérologie d’hépatite B «ACHBC» et C « ACHVC ».  Bilan de thyroïde : TSH, T4, T3.  Bilan de fertilité : FSH, LH, Prolactine, Testostérone.  Autres : Réaction à antigène non tréponèmique « VDRL », réaction à antigène tréponémique « TPHA » et Protéine C- Réactif « CRP »… 3. Biochimie Au niveau de cette paillasse plusieurs paramètres sont dosés selon les bilans demandés :  Le bilan glucidique (glycémie à jeun, hémoglobine glyquée).  Le bilan rénal (urémie, créatinémie).  Le bilan lipidique (cholestérolémie total, HDL, LDL, triglycéridémie).  Le bilan hépatique (transaminase « ALAT et ASAT », gamma- glutamytransférase « gamma-GT », Phosphatase Alcaline, Bilirubine « Total, Indirect, conjuguée »).  Bilan hydro-électrolytique (sodium, potassium, chlore).  Autres (Acide urique, Amylase, lipase, protéine total, albuminémie, calcium, Protéine urinaire, ASLO, CRP) 4. Microbiologie Parmi les tests microbiologiques appliqués dans le laboratoire AHANOU :  Examen cytobactériologique des urines (ECBU)  Examen cytobactériologique des sécrétions vaginales (PV)  Examen parasitologique et coproculture des selles  Spermogramme et spermoculture  Bacile de Koch (Bk) III. DIFFERENTES PHASES ANALYTIQUES Les examens de biologie médicale se déroulent en trois phases : 1. La phase pré-analytique Ce terme englobe toute la partie qui précède l’analyse. La grande partie de cette phase se déroule dans le laboratoire AHANOU au niveau de la salle de prélèvement et d’accueil. Elle concerne : le prélèvement, l’étiquetage et le transport d’échantillon, la dernière étape dans cette phase (la préparation d’échantillon pour l’analyse) se fait au niveau des salles techniques. Accueil et prélèvement o La secrétaire accueille le patient, lui crée un dossier complet contenant toutes les informations personnelles. Après quoi, elle inscrit les examens en fonction de l’ordonnance du médecin. Enfin, elle complète le dossier par une étiquette contenant la référence. o L’infirmière prend les dossiers des patients et appelle à tour de rôle pour effectuer les prélèvements. Il (Elle) valide les informations de chaque personne et choisit le type de tube qui convient. Tubes de prélèvement Le choix des tubes de prélèvement s’effectue selon l’examen demandé. Il existe deux types : soit avec ou sans anticoagulant. - Tube avec anticoagulant : Pour garder le sang à l’état fluide lors d’un prélèvement on utilise un « anticoagulant », son rôle est de bloquer une ou toutes les réactions qui transforment le fibrinogène en fibrine. Donc, il existe différents types d’anticoagulants dans différents tubes pour différentes analyses (Héparine de lithium, Citrate de sodium, EDTA : Ethylène Diamine Tétra-Acétique, fluorure de sodium). (Voir Tableau 1). - Tube sans anticoagulant : Pour obtenir le sérum on utilise des tubes secs (sans anticoagulant) pour coagulation naturelle (pendant 30min). (Voir Tableau1). Remarque:  Le volume à prélever du sang est indiqué sur les flacons.  Il faut respecter le rapport sang/anticoagulant : surtout en cas d’hémostase et test de vitesse de sédimentation. Tableau 1: Les différents anticoagulants et tubes utilisés Les tubes Les anticoagulants Les analyses effectuées Avec anticagul ant Le bleu Citrate de sodium Coagulation (T.P /TCK) Le violet EDTA : Ethylène Diamine Tétra- Acétiq ue Hématologie :(NFS) Le noir Citrate de sodium Vitesse de sédimentation Le gris Fluorure de sodium Dosage de Glucose Sans anticoagul ant Le rouge Sec : sans anticoagul ant Analyse sur sérum : (biochimie, sérologie) Ordre de prélèvements des tubes Si l’on prélève plus d’un échantillon lors de la ponction veineuse, il est recommandé d'effectuer les prélèvements dans l'ordre qui suit pour éviter la possibilité d’un résultat erroné. 1. Tube pour analyse de sérum (tube : bouchon rouge). 2. Tube pour la coagulation (tube de bouchon bleu). 3. Tube pour la vitesse de sédimentation (tube : bouchon noir) 4. Tube pour l’hématologie (tube: bouchon violet). 5. Tube pour analyse de plasma (tube : bouchon vert). o Les infirmières assurent l’acheminement des tubes aux salles des analyses pour la phase analytique. La préparation d’échantillon pour l’analyse Se sont les techniciens qui se chargent de la préparation des échantillons par : - La vérification et l’identification des numéros uniques des tubes de chaque patient. - Le contrôle des automates et la mise en marche des appareils et vérification des réactifs. - La répartition des tubes dans les différentes paillasses selon les analyses demandées. - La Centrifugation des tubes pour travailler sur sérum ou plasma en respectant le temps, la vitesse et la température de centrifugation pour préserver au mieux l’échantillon dans les conditions souhaitées. o Les tubes de chimie doivent être centrifugés pendant 10 minutes, car l’analyse se fait sur du sérum. o Les tubes de plasma pour les analyses uploads/Management/ rapport-bioanalyses-medicales.pdf