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1 REPUBLIQUE DU SENEGAL MINISTERE DE LA SANTE ET DE L’ACTION SOCIALE ----------

1 REPUBLIQUE DU SENEGAL MINISTERE DE LA SANTE ET DE L’ACTION SOCIALE ---------- DIRECTION GENERALE DE LA SANTE ---------- DIRECTION DE LA LUTTE CONTRE LA MALADIE PROGRAMME NATIONAL DE LUTTE CONTRE LE PALUDISME Ministere de la sante et de l‘action sociale République du Sénégal un peuple - un but - une foie GUIDE NATIONAL de diagnostic biologique du Paludisme 2 Guide national de diagnostic biologique du paludisme T able des matières Sigles et abréviations 03 Préface 04 Introduction 05 Objectifs du guide 06 Rappels sur le paludisme 06 Diagnostic biologique du paludisme par le TDR 08 Diagnostic biologique du paludisme par la microscopie 12 Diagnostic biologique par les techniques de biologie moleculaire 32 Directives d’utilisation des outils de diagnostic biologique du paludisme selon les niveaux et facies 39 Conclusion 45 Bibliographie 45 Annexes 46 3 SIGLES ET ABREVIATIONS ADN Acide Désoxyribonucléique AN Acide Nucléique ARN Acide Ribonucléique BM Biologie Moléculaire Cm Centimètre CS Centre de Santé CSSI Chef du Service des Soins Infirmiers DP Densité Parasitaire DS District Sanitaire DSDOM Dispensateur de Soins A Domicile ECD Equipe Cadre de District EDTA Ethylène Diamine Tétra Acétique ELISA Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay FIND Foundation for Innovative News Diagnostics GB Globule Blanc GE/FM Goutte Epaisse/Frottis Mince GR Globule Rouge GRp Globule Rouge parasité HRP2 Histidin Rich Protein 2 ml Millilitre mm3 Millimétre Cube MSAT Mass Screening And Treat Nbre Nombre N° Numéro OMS Organisation Mondiale de la Santé Pb Paire de base PCR Polymerase Chain Reaction PECADOM Prise En Charge des Cas A Domicile P.f Plasmodium falciparum pLDH Plasmodium Lactico-Déshydrogénase PNLP Programme National de Lutte contre le Paludisme PSN Plan Stratégique National P.v Plasmodium vivax qPCR Quantitative Polymerase Chain Reaction RFLP Restriction Fragment Length Polymorphism RM Région Médicale RT-PCR Real Time- Polymerase Chain Reaction TDR Test de Diagnostic Rapide LAMP Loop Mediated Isothermal Amplication VIH Virus Immunodéficience Humaine µl Microlitre 4 Guide national de diagnostic biologique du paludisme Préface Au Sénégal, le plan stratégique national (PSN) 2016 - 2020 de lutte contre le paludisme a pour objectifs de réduire l’incidence et la mortalité liées au paludisme d’au moins 75% et d’interrompre la transmission locale dans les districts de la zone nord. L’atteinte de ces objectifs passera nécessairement par un accès rapide à un diagnostic de qualité et à un traitement efficace des cas. Dans cette perspective, des orientations stratégiques ont été définies pour consolider et améliorer les résultats obtenus lors des cinq dernières années. Parmi ces orientations retenues dans le PSN 2016-2020, l’élaboration d’un guide national pour le diagnostic biologique constitue une innovation et une condition fondamentale pour un diagnostic de qualité. Ainsi, en s’inspirant du processus de mise en œuvre recommandé par l’Organisation Mondiale de la Santé (OMS), le Sénégal a tenu un atelier national impliquant les acteurs à tous les niveaux et les partenaires, ce qui a permis d’obtenir ce guide sur le diagnostic biologique. Ce document de référence est destiné aux prestataires de santé, aux biologistes et agents communautaires de soins. Il servira de référence pour le respect des normes et procédures du diagnostic biologique du paludisme au Sénégal. Il me plait ici d’inviter l’ensemble des acteurs des services publics, parapublic et privé à s’approprier le contenu de ce présent guide et de veiller à sa bonne utilisation dans les activités de formation pour une harmonisation des méthodes de diagnostic biologique du paludisme au Sénégal. L’utilisation de ce guide permettra un diagnostic de qualité de l’infection palustre, gage d’une bonne prise en charge nécessaire pour atteindre les objectifs ambitieux du PSN 2016- 2020 Tous ensemble, pour un Sénégal émergent sans paludisme pour un développement durable. 5 I. Introduction Dans le plan stratégique de lutte contre le paludisme 2011- 2015, le diagnostic biologique du paludisme au Sénégal reposait sur la goutte épaisse/frottis mince et les tests de diagnostic rapide (TDR). L’impact des interventions de lutte contre le paludisme, ces dernières années, a fortement modifié la répartition géographique du fardeau de la maladie. Cette nouvelle configuration impose une stratification plus opérationnelle permettant d’adapter les interventions aux caractéristiques épidémiologiques locales. Cette évolution de la situation épidémiologique du paludisme au Sénégal impose naturellement l’adoption d’outils de diagnostic adaptés aux différentes zones identifiées. En 2016, le Sénégal a adopté un nouveau plan stratégique national (PSN) de lutte contre le paludisme. Ce plan a pour objectifs de réduire l’incidence et la mortalité liées au paludisme d’au moins 75% et d’interrompre la transmission locale dans les districts de la zone nord. Globalement, deux zones à niveaux différents d’endémicité sont identifiées : les zones nord d’endémicité faible où les objectifs visent une consolidation des acquis en vue d’atteindre l’élimination et le reste du pays où l’endémicité est plus importante. Cette nouvelle configuration impose une utilisation de TDR plus sensibles, de la biologie moléculaire dans les zones Nord et de TDR pan spécifiques capables de diagnostiquer les espèces autres que Plasmodium falciparum dans le reste du pays particulièrement au Sud. Les objectifs pour le diagnostic biologique déclinés dans le PSN sont les suivants : • Introduire la biologie moléculaire dans les zones de faible transmission pour détecter les faibles parasitémies ; • Diagnostiquer par TDR ou goutte épaisse/frottis mince 100% des cas suspects selon les directives nationales. Pour atteindre ces objectifs, le PNLP en collaboration avec les acteurs a élaboré ce guide destiné aux acteurs à tous les niveaux de la pyramide sanitaire pour améliorer le diagnostic biologique du paludisme. Il tient compte aussi bien des normes et standards internationaux édictés par l’OMS que du contexte sénégalais. Le guide se divise en trois grandes parties articulées autour: • Du diagnostic biologique par les TDR ; • Du diagnostic biologique par la microscopie ; • Du diagnostic biologique par les techniques de biologie moléculaire. Par ailleurs, une partie importante est réservée au contrôle de qualité. Ce point est particulièrement utile à tous les niveaux de la pyramide sanitaire où les normes de qualité doivent être respectées. 6 Guide national de diagnostic biologique du paludisme II. Objectifs du guide Les objectifs de ce présent guide sont : • Disposer d’un document national de référence pour les techniques de diagnostic biologique du paludisme (TDR, microscopie et BM) • Disposer de directives pour l’utilisation des techniques de diagnostic biologique du paludisme (TDR, microscopie et BM) par niveau et selon les faciès • Contribuer à l’amélioration continue de la qualité du diagnostic biologique du paludisme III. Rappels sur le paludisme Le paludisme est dû à un organisme vivant, appelé Plasmodium, qui infecte les globules rouges d’une personne. Il se transmet d’une personne à l’autre principalement par l’intermédiaire des piqûres de femelles de moustiques, les anophèles et par voie transplacentaire de la mère au fœtus durant la grossesse. Il existe cinq espèces qui peuvent parasiter l’homme : Plasmodium falciparum, P.malariae, P.vivax, P.ovale et P.knowlesi. Parmi celles- ci, Plasmodium falciparum est l’espèce la plus redoutable parce qu’étant responsable de la majeure partie des formes graves du paludisme et représente environ 98% des cas de paludisme au Sénégal. Les deux autres espèces rencontrées au Sénégal sont P.malariae et P.ovale pour moins de 2% sur la base de plusieurs études. Le paludisme pose un grave problème de santé publique dans de nombreuses régions du monde. Les accès peuvent être sévères et provoquer rapidement la mort en l’absence de traitement. Environ 3,2 milliards de personnes, soit près de la moitié de la population mondiale – sont exposées au risque de contracter la maladie. L’Afrique subsaharienne continue de supporter une part importante de la charge mondiale du paludisme. En effet pour l’année 2015, 88% des cas de paludisme et 90% des décès dus à cette maladie sont survenus dans cette région. Entre 2000 et 2015, l’incidence du paludisme (le nombre de nouveaux cas parmi les populations exposées) a baissé de 37% à l’échelle mondiale tandis que le taux de mortalité a reculé de 60% toutes tranches d’âge confondues et de 65% chez les enfants de moins de 5 ans. Les jeunes enfants, les femmes enceintes et les voyageurs venant de régions exemptes de paludisme sont particulièrement vulnérables à la maladie lorsqu’ils sont infectés. Le paludisme est une maladie évitable et curable si la prise en charge est précoce et adéquate. Signes cliniques et symptômes du paludisme Les symptômes habituels sont les suivants : une forte fièvre, des maux de tête, des frissons, des sueurs profuses et des courbatures dans tout le corps. Il arrive que certains patients vomissent, toussent, aient de la diarrhée ou fassent des convulsions. Dans le cas des infections persistantes ou récurrentes, on peut observer une anémie. Comme on observe des signes cliniques similaires dans d’autres maladies courantes, des investigations plus approfondies sont nécessaires avant de pouvoir diagnostiquer le paludisme avec fiabilité. Cycle parasitaire Chez le moustique : le cycle sexué Il commence lorsqu’une femelle d’anophèle prend son repas de sang sur une personne infectée. Les parasites mâles (microgamétocytes) dans le sang de la personne infectée sont alors aspirés dans l’estomac du moustique 7 et produisent quatre à huit flagelles (ex flagellations). Chacun d’eux se sépare de l’organisme qui lui a donné naissance et lorsqu’il rencontre uploads/Sante/ guide-national-de-diagnostic-biologique-du-paludisme-pdf 1 .pdf