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culture-qualité Proposition de commentaires interprétatifs prêts à l’emploi pou

culture-qualité Proposition de commentaires interprétatifs prêts à l’emploi pour l’électrophorèse des protéines sériques A proposal of ready-made interpretative comments applicable to serum protein electrophoresis A. Szymanowicz1 B. Cartier 2 J.-P. Couaillac3 C. Gibaud4 G. Poulin5 H. Rivière6 D. Le Carrer7 Groupe de travail du Collège national de biochimie des hôpitaux 1 Laboratoire de biochimie, Centre hospitalier de Roanne <anton.szymanowicz@ch-roanne.fr> 2 Service de biochimie, Hôpital Lucien Hussel, Vienne 3 Service de biologie, Centre hospitalier de Cahors 4 Laboratoire de biologie, Centre Hospitalier St-Joseph-St-Luc, Lyon 5 Service de biochimie, Centre hospitalier J. Monod, Flers 6 Service de biologie, Centre hospitalier de Rodez 7 Laboratoire de biochimie spécialisée, Nantes Article reçu le 2 janvier 2006, accepté le 14 mars 2006 Résumé. L’analyse des protéines sériques par électrophorèse est une analyse utile dans de nombreuses situations pathologiques pour orienter un diagnostic, préciser la gravité d’une maladie ou suivre l’efﬁcacité d’une thérapeutique. L’obligation légale est faite au biologiste d’accompagner chaque résultat d’un commentaire. Le but est de favoriser l’interprétation du résultat et d’en assurer la pleine exploitation par le clinicien, voire de satisfaire les patients qui souhai- tent bénéﬁcier d’une double information : du prescripteur et du biologiste. Aﬁn d’aider les biologistes à répondre à ces objectifs, notre groupe de biologistes, sous l’égide du Collège national de biochimie des hôpitaux (CNBH) a établi, une liste de commentaires prêts à l’emploi que nous proposons comme outil facilitant la validation des électrophorèses des protéines sériques. Mots clés : électrophorèse, protéine, sérique, Capillarys®, commentaire Abstract. Zone electrophoresis for separation and quantiﬁcation of serum proteins is useful in numerous pathological situations to make clinical diagnos- tics, to follow the evolution of a disease or to evaluate the efﬁciency of a treatment. The biologist must apply professional recommendations according to the ofﬁcial nomenclature of biological analysis. He must attach a comment to each result in order to help the physician to perform the best interpretation of the results. To answer those needs, a work of standardization of these com- ments has been realized by a group of biologists. They are members of the national college of biologists (CNBH). All the commentaries are assembled in a thesaurus which could be a base of ready-made comments, favouring the interpretation of serum protein electrophoresis results. Key words: serum, protein, electrophoresis, Capillarys®, comment Le principe de l’électrophorèse des protéines est connu depuis les premiers travaux de Tiselius dans les années 1930. Il met en jeu le déplacement des protéines ionisées lorsqu’elles sont soumises à un champ électrique dans des conditions déﬁnies de force ionique, de pH, de durée et d’intensité du courant électrique appliqué. L’électropho- rèse des protéines a été adaptée pour la biologie clinique dans les années 1940. Cette méthode s’est progressive- ment perfectionnée, miniaturisée et standardisée pour atteindre sa maturité vers la ﬁn des années 1990. Depuis une dizaine d’années, en 1994 est apparue une nouvelle méthode : l’électrophorèse capillaire développée par la société Beckman Coulter sous la dénomination Paragon CZE 2000®. Ce principe a été aussi développé plus récem- ment par la société Sebia qui commercialise depuis 2001 un nouvel appareillage le Capillarys®. Ce matériel semble Tirés à part : A. Szymanowicz abc Ann Biol Clin 2006 ; 64 (4) : 367-80 Ann Biol Clin, vol. 64, n° 4, juillet-août 2006 367 bien répondre à l’attente des biologistes et gagne réguliè- rement du terrain sur l’électrophorèse traditionnelle sur gel. Dans des conditions techniques automatisées bien maîtrisées [1], les résultats des analyses par électropho- rèse sont devenus reproductibles et précis. Cela est bien conﬁrmé par les résultats des campagnes de contrôle de qualité externes régionaux et nationaux, même si certains sérums de contrôle révèlent des pics artéfactuels par élec- trophorèse capillaire. Ces anomalies ne sont actuellement pas encore complètement expliquées. L’électrophorèse capillaire, comme l’électrophorèse sur gel d’agarose, per- met la séparation de 6 fractions de protéines. L’ordre de migration est inversé par rapport à l’électrophorèse sur gel car le déplacement des protéines utilise en fait le courant d’électroendosmose [1]. L’ordre traditionnel a cependant été conservé par le fournisseur aﬁn de ne pas perturber les habitudes des utilisateurs biologistes et médecins. L’image du proﬁl obtenu est présenté sur la ﬁgure 1. Cet ordre des fractions est celui le plus largement utilisé pour la représentation des proﬁls d’électrophorèse des protéines du sérum. L’électrophorèse des protéines sériques bénéﬁcie d’indi- cations cliniques consensuelles et d’autres plus subjecti- ves dépendantes des écoles de formation des médecins, ce qui implique la nécessité de pouvoir disposer de recom- mandations de bonne pratique de prescription et d’inter- prétation de cet examen. L’indication principale et incontestable de l’électropho- rèse est le dépistage, à faible coût, d’une immunoglobuli- nopathie. La recommandation de pratiquer cet examen dans ce cadre ﬁgure d’ailleurs dans nombre de guides de bonne pratique [2-4]. Lorsque le diagnostic de malignité est posé et le traitement mis en œuvre, le suivi de l’efﬁca- cité thérapeutique est également assuré par l’électropho- rèse le plus souvent. Cette dernière recommandation [2] est d’ailleurs en passe d’être ofﬁciellement conﬁrmée par la National academy of clinical biochemistry [5]. De même, le suivi de l’évolution des gammapathies de signi- ﬁcation indéterminée (monoclonal gammopathy of unde- termined signiﬁcance (MGUS) ou gammapathies quies- centes idiopathiques) est habituellement effectué par l’électrophorèse semestrielle puis annuelle en situation stable du pic monoclonal, certains cliniciens y ajoutant éventuellement un myélogramme lors de la découverte initiale de l’anomalie. L’électrophorèse donne, d’autre part, un reﬂet panorami- que de l’ensemble des protéines sériques et peut à ce titre dépister, notamment un syndrome inﬂammatoire (zones alpha-1 et alpha-2), une carence martiale (zone bêta), une hémolyse intra-vasculaire (zone alpha-2), une cirrhose (zone bêta-gamma), une maladie infectieuse, auto- immune ou de système (zone alpha-1, alpha-2, bêta et surtout gamma), un déﬁcit congénital ou acquis des immunoglobulines ou d’autres protéines (albumine, alpha-1 antitrypsine et gammaglobulines notamment) ou d’évaluer le retentissement d’une pathologie connue, voire d’en assurer le suivi : atteinte hépatique (dont une cirrhose ou une hépatite), atteinte rénale (dont un syndrome néph- rotique), digestives, etc. [6, 7]. Les résultats de cet examen doivent légalement être accompagnés d’un commentaire qui favorise la bonne interprétation de l’analyse et assure sa pleine exploitation par le clinicien, tout en satisfaisant l’information des patients [8-12]. Il est toutefois démontré que les commen- taires interprétatifs ne répondent pas toujours très bien à l’attente des cliniciens ou des patients, ce qui soulève d’ailleurs des débats dans les pays où la biologie est exer- cée par des professionnels moins qualiﬁés qu’en France [12, 13]. Dans ce contexte nous avons élaboré, au sein d’un groupe de travail du CNBH, un catalogue de proposi- tions de commentaires les plus précis et didactiques possi- bles. Ces commentaires ont été validés par un biologiste, spécialisé dans le domaine de l’électrophorèse et des pro- téines sériques et n’appartenant pas au CNBH. Matériels et méthodes Dans une première étape, nous avons établi la liste des commentaires habituellement utilisés dans leur pratique professionnelle par les membres du groupe de travail. Le coordonnateur en a assuré une mise en forme commune correspondant à la version I, adressée ensuite aux mem- bres du groupe. Les modiﬁcations proposées par ces der- niers ont été réintégrées par le coordonnateur dans une version II et renvoyées pour validation. La version II a Identification des fractions Albumine Alpha-1 glycoprotéine acide Gammaglobulines Ordre de détection des fractions Albumine Alpha-1 Bêta-1 Gamma Alpha-2 Bêta-2 Complément C3 Transferrine Hémopexine Alpha-1 antitrypsine Haptoglobine Alpha-2 macroglobuline Figure 1. Proﬁl d’électrophorèse des protéines sériques obtenu par Capillarys. culture-qualité Ann Biol Clin, vol. 64, n° 4, juillet-août 2006 368 ensuite été soumise pour validation à un biologiste réfé- rent pour notre groupe : le docteur Didier Le Carrer (labo- ratoire de biochimie spécialisée, 9 quai Moncousu, B.P. 1005, 44093 Nantes Cedex 1) qui a proposé des améliora- tions. Celles-ci ont été prises en compte par le coordonna- teur aboutissant à la version III qui a été ﬁnalement diffu- sée auprès des membres du groupe. Ce thésaurus enrichi a été soumis à l’épreuve de l’utilisation pratique pendant 4 années [14] et réactualisé en juin 2005 par le coordonna- teur dans une version IV. Celle-ci a été revalidée une der- nière fois par l’ensemble du groupe. Tout au long de ce processus d’élaboration, la revue régulière de la littérature et l’utilisation des textes ainsi proposés ont permis de conforter par certains éléments de preuves la grande majo- rité des commentaires. C’est cette version IV qui est pré- sentée dans l’article. L’utilisation de ces textes prêts à l’emploi peut s’appuyer très utilement sur le paramétrage du système informatique du laboratoire (SIL) selon les axes décrits dans la partie résultats et dans les tableaux 1 à 5. Dans cette perspective, ces textes sont saisis dans le dic- tionnaire des textes codés du SIL. Ils peuvent alors être sélectionnés selon les besoins par le biologiste, au cours de l’étape de validation des électrophorèses. Cette sélec- tion est très aisée grâce au principe de la boite de dialo- gue, disponible aujourd’hui dans tous les SIL. Le cas échéant, le biologiste conserve toute son initiative pour compléter les commentaires par des textes libres uploads/Sante/ propo-commentaire-epps.pdf