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Diagnostic rapide de la mammite clinique Jean-Philippe Roy1, Jodi-Ann Wallace2

Diagnostic rapide de la mammite clinique Jean-Philippe Roy1, Jodi-Ann Wallace2 & Caroline Vézina3 1Professeur adjoint, Faculté de médecine vétérinaire, Université de Montréal 2Clinique vétérinaire Ormstown et étudiante M.Sc., FMV 3Productrice, Ferme Tranquillity, Brownsburg-Chatham Colloque sur la santé des troupeaux laitiers 12 décembre 2007, Québec – Atelier mammite Introduction • La mammite clinique = raison #1 pour l’usage des antibiotiques chez les vaches (Erskine et al., The Vet. Clinics of N.A., 2003) • En basant certaines décisions de traitement sur les résultats bactériologiques, l’utilisation d’antibiotiques peut être significativement diminuée (Silva, NMC, Proc. 2004) • Une réduction de l’usage des antibiotiques aiderait à : 1) prévenir les pertes de lait 2) réduire le risque d’avoir des résidus dans le lait 3) améliorer les taux de succès des traitements en raison de traitements mieux ciblés (Neeser et al., JAMVA, 2006) Situation actuelle • Actuellement, la bactériologie standard du lait permet peu d’aider à la prise de décision pour le traitement des mammites cliniques (délais 2 à 5 jours) • Il y a maintenant des outils diagnostiques rapides de la mammite disponibles • Comment intégrer ces outils dans la gestion de la santé du pis à la ferme ou en clinique vétérinaire ? Les pathogènes retrouvés sur 500 cas de mammite clinique Catégorie de traitement n (%) Aucune croissance 116 (23,3) Gram positif 277 (55,4) Gram négatif 92 (18,4) Autres (levures/algue) 15 (3) Total 500 G. Keefe, (RCRMB, cohorte nationale) Pas de croissance • 20 à 50 % des échantillons • Causes : – Élimination spontanée des bactéries – Excrétion cyclique des bactéries – Faible nombre de colonies (< 100 CFU/ ml) – Bactéries phagocytées Les agents pathogènes qui causent la mammite Gram positif Gram négatif Autres Staphylococcus spp. Escherichia coli Mycoplasma spp. Staphylococcus aureus Klebsiella spp. Levures Streptococcus uberis Enterobacter spp. Prototheca Streptococcus dysgalactiae Serratia spp. Streptococcus agalactiae Pasteurella spp. Corynebacterium bovis Proteus spp. A. pyogenes Pseudomonas spp. Outils diagnostiques Minnesota Bi-plates • Développé par Université du Minnesota • Milieu sélectif : MacConkey et gélose au sang avec 1 % esculine • Permet classification des bactéries en Gram + ou Gram - • Parfois, peut permettre ID Staph aureus Minnesota Tri-plates • Développé par l’Université du Minnesota • Permet identification Gram +, Gram – et streptocoques • Parfois peut permettre ID Staph aureus Petrifilm™ Plaques Staph Express (STX) ID Staph. aureus 22-26h - résultats finaux • Milieux de culture sélectifs de 3M Microbiologie • Utilisés présentement dans le secteur alimentaire (Tassinari et al, Food Quality Magazine, 2006; Ingham et al., J.Food Prot., 2003) Num. Aérobie (PAC) ID aérobies (Flore totale) (Streptocoques) 24h & 48h - résultats Petrifilm™ Num. rapide des Coliformes (RCC) ID Coliformes Changement couleur 6 -12h 24h résultats finaux Num. Coliformes (CC) ID Coliformes 24h résultats finaux Mise en garde • La qualité de l’échantillon de lait prélevé est primordiale • La technique de prélèvement doit être le plus stérile possible afin d’éviter la contamination de l’échantillon et une interprétation erronée Application à la ferme Mammite clinique Mammite Clinique Examen Pas de FIÈVRE, appétit normal = Mam. Grade 1-2 : prendre échantillon, attendre résultats pour TX FIÈVRE et/ou ne mange pas = Mam. Grade 3 : traitement avec anti- inflammatoires, fluides, surveille, +/- antibiotiques, ± prendre échantillon Ensemence 1cc de lait sur 1.STX 2. CC Positif S. aureus Aucun Ab IMM; Tx avec anti- inflammatoires, fluides et surveille Nouvelle infection: 1er cas, un quartier, lactation 1 ou 2, bas CCS : Thérapie prolongée Vérifie CCS Si chronique, haut CCS; Aucun tx, ségrégation, réforme Positif Coliformes Négatif S. aureus, Positif croissance Croissance G+ : Vérifie CCS et histoire de mamm, Tx IMM produit homologué S’il n’y a aucun changement Æ envoyer échantillon congelé au laboratoire pour une bactériologie standard Mammite Clinique Examen Pas de FIÈVRE, mange bien = Mam. Grade 1-2 : prendre échantillon, attendre résultats pour TX FIÈVRE et/ou mange pas = Mam. Grade 3 : traitement avec anti- inflammatoires, fluides, surveille, +/- antibiotiques, +/- prendre échantillon Ensemencer sur Tri-plate Croissance dans zone G+ seulement : S. aureus ou Staph. spp. Croissance dans zone rouge et brune; Strep. spp. = Tx avec Ab IMM Croissance dans zone G-; Aucun tx Ab, continuer les fluides, anti-inflam. et surveille Staph. spp. Tx avec Ab IMM et surveille Staph. aureus: Vérifie CCS Si chronique haut CCS = Aucun tx, ségrégation, réforme Staph. aureus: 1er cas, un quartier, lactation 1 ou 2, bas CCS : Thérapie prolongée Ou Adapté de L.Tikofsky S’il n’y a aucun changement Æ envoyer échantillon congelé au laboratoire pour une bactériologie standard Application à la ferme Dépistage du Staph. aureus + S. aureus - S. aureus + S’il n’y a aucun changement Æ envoyer échantillon congelé au laboratoire pour bactériologie standard D Dé épistage de Staph. aureus pistage de Staph. aureus au vêlage : Ferme XYZ au vêlage : Ferme XYZ CMT •Prendre échantillon •Ensemence 1cc de lait sur Petrifilm STX •congèle l’échantillon Composite ou Surveille CCS Vérifie CCS Si chronique haut CCS = Aucun tx, ségrégation, réforme Nouvelle infection : 1er cas, un quartier, lactation 1 ou 2, bas CCS = Thérapie prolongée Négatif S. aureus, Positif croissance Croissance G+ : Vérifie CCS et histoire de mammites Tx IMM produit homologué Vêlage, haut CCS, achats Aucune croissance Surveille CCS Résultats d’études Mammite Clinique Examen Pas de FIÈVRE Mam Grade 1-2 : prendre échantillon, attendre pour résultats de culture FIÈVRE Mam. Grade 3 : prendre échantillon, traitement avec anti-inflammatoires, fluides, surveille Culture standard à la ferme S. aureus ATB IMM, ségrégation, réforme S. ag. Staph. spp Strep. spp Coliformes Pas de croissance ATB IMM ségrégation ATB IMM ATB IMM Pas ATB Anti- inflammatoire, surveille Pas ATB Anti- inflammatoire, surveille Résultats • Diminution 80 % de l’usage des antibiotiques lors de mammites cliniques • 55 % pas de croissance, 25 % Gram – • Souvent signes de mammite absents 24h plus tard • TX = pas de retour plus rapide en production, pas moins de quartiers perdus, lait anormal aussi longtemps Résultats d’étude • Étude Université du Wisconsin, 2004 – Implantation d’un protocole de traitement avec cultures du lait sur STX, CC, PAC – 600 vaches – Comparaison des résultats de culture à la ferme avec et sans protocole de traitement Mammite Clinique Examen Pas de FIÈVRE Mam. Grade 1-2 : prendre échantillon, attendre pour résultats de culture FIÈVRE Mam. Grade 3 : prendre échantillon, traitement avec anti-inflammatoires, fluides, +/- antibiotiques & surveille Ensemencer 1cc de lait sur 1. STX 2. CC 3. PAC Positif S. aureus Aucun Ab IMM; Tx avec anti- inflammatoires, fluides et surveille Nouvelle infection: 1er cas, un quartier, lactation 1 ou 2, bas CCS: Thérapie prolongée Vérifie CCS Si chronique haut CCS; Aucun tx, ségrégation, réforme Positif Coliformes ou aucune croissance Négatif S. aureus, Positif croissance PAC + Croissance G+: Vérifie CCS et histoire de mamm., Tx IMM produit homologué Résultats d’étude Résultats Sans protocole (n=100 cas) Avec protocole (n=267 cas) P value Jours lait jeté 19,7 7,8 <0,001 # tubes IMM/cas 33,3 5,3 * <0,001 Cas qui reçoit tubes IMM 87 % 33 % <0,001 Coût des tubes et lait jeté / cas 264 $ 90 $ *une partie de la réduction est due à une changement des tubes IMM à 1x/jr Impact économique • Étude Iowa State : Coût par 100 animaux présentant une mammite clinique – Traitement tous les cas : 285 $/100 cas – Traitement basé sur la culture : 99 $/100 cas – Le succès thérapeutiques n’était pas différent entre les groupes malgré un délai de 24 heures Impact économique • Université de Cornell : Un troupeau de 100 vaches peut économiser 3 000 $ par an en utilisant les traitements basés sur les résultats de culture • Si traitement seulement des streptocoques, économie jusqu’à 5 000 $ par an Avantages d’un programme de contrôle incluant des traitements basés sur les résultats de culture • Réduction des coûts des Ab • Réduction du risque de résidus dans le lait • Réduction des pertes de lait car moins de cas traités avec Ab • Réduction du délai d’attente pour la réforme Avantages de faire la culture à la ferme ou en clinique vétérinaire • Accessibilité du laboratoire – fins de semaine et congés • Rapidité – Résultats préliminaires sont disponibles en 24h Limitations • Ne permet pas l’identification des mycoplasmes • Les levures peuvent croître sur les plaques comme un Gram + mais le traitement antibiotique risque d’empirer la situation Coûts Bi-plate : 1,75 $ Tri-plate : 2,80 $ Plus frais de transport Coûts ($) •Petrifilm Staph Express •Staph Express Disques •Petrifilm Coliformes •Petrifilm Coliformes Rapides •Petrifilm Count Aérobique •Pipettes stériles •Tubes de dilution Bo Boî îte te Caisse Caisse 2,34 1,99 1,53 1,37 1,00 0,81 2,14 1,65 0,91 0,76 0,17 1,10 Coûts de démarrage EQUIPEMENT COÛTS ($) Incubateur (aérobie) 37OC 100 - 400 Réfrigérateur/Congélateur 80 - 300 Applicateurs stériles 20 - 40 Matériel pour prise d’échantillons de lait Variable Pièce propre, tempérée, bien éclairée Variable Poubelle pour déchets bio-médicaux Variable MEDIA Matériel additionnel • Microscope et coloration Gram • Test coagulase • uploads/Sante/diagnostic-rapide-conf.pdf