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Techniques d x27 analyses microbiologiques abb 3

TECHNIQUES D ? ANALYSES MICROBIOLOGIQUES OBJECTIFS DE CE TP A la ?n du TP de techniques d ? analyses microbiologiques chaque étudiant doit être capable de Caractériser un micro-organisme sur le plan morphologique biochimique et métabolique - Faire un antibiogramme en évaluant la sensibilité d ? un microorganisme à di ?érents agents antibactériens - Maitriser l ? ensemencement d ? une galerie API - Maitriser la lecture des résultats d ? une galerie API CSEANCE INTRODUCTION Un germe isolé et puri ?é peut subir un certain nombre de tests conduisant à son identi ?cation On réalise a cette e ?et di ?érentes observations portant sur Des caractères morphologique micro et macroscopiques - Des caractères physiologiques - Des caractères biochimiques et métaboliques - Des caractères immunologiques Tous ces tests se placent en ?n d ? analyse d ? un produit prélèvement pathologique etc ? et ne peuvent se faire que sur des souches microbiennes isolés et puri ?ées Certains tests sont présomptifs d ? autres con ?rmatifs L ? association de certains de ces di ?érents tests permet à l ? aide d ? un tableau dichotomique d ? identi ?cation de donner le genre ou l ? espèce à laquelle appartient un microorganisme recherché Etape d ? une analyse conduisant à l ? identi ?cation d ? un microorganisme ? Produit à analyser ? Sélection d ? un type de microorganisme - Milieu nutritif électif - Milieu sélectif - Milieu nutritif di ?érentiel - Milieu d ? enrichissement ? Isolement et puri ?cation sur tube incliné ou en bo? te de Pétri ? Identi ?cation d ? un germe puri ?é - Des caractères morphologique micro et macroscopiques - Des caractères physiologiques - Des caractères biochimiques et métaboliques - Des caractères immunologiques CSEANCE LES CARACTERES MORPHOLOGIQUES DES BACTERIES I- LES CARACTERES MORPHOLOGIQUES Macroscopiques L ? observation de l ? aspect macroscopique des colonies permet d ? e ?ectuer une première caractérisation avec une orientation possible des résultats au cours de l ? identi ?cation Les éléments d ? identi ?cation macroscopiques sont Pour la gélose solide en boite de pétri et en tube incliné Forme Punctiforme circulaire ondulé lobé érodé ?lamenteuse rhizo? de striation radiale striation concentrique en fuseau dans la masse Taille Diamètre de la colonie Couleur Pigmentation de la colonie ou autour de la colonie Opacité Transparente translucide opaque ? ? ? Hauteur ou coupe Plate élevé convexe en dôme ombiliquée de la colonie Surface Lisse rugueuse émoussée brillante sèche poudreuse plissée Consistance Visqueuse granulaire Odeur Présente ou absente Pour le milieu nutritif liquide Trouble Intense faible pigmentation ou non voile Masse cellulaire en surface collerette Dépôt Agrégation de cellule au fond du tube Odeur Caractéristique Microscopiques Ce sont les premiers tests à réaliser puisqu ? ils peuvent décider de la voie d ? identi ?cation à suivre par exemple on ne ferra un test de catalase que pour di ?érencier les bactéries GRAM et ce test n ? est pas e ?ectué pour les bactéries GRAM -