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Hématologie Cellules normales du sang et de la moelle rouge des os Livret 1 d'a

Hématologie Cellules normales du sang et de la moelle rouge des os Livret 1 d'activités technologiques Chantal Muller (Professeur - Lycée La Martinière Duchère - LYON ) Remerciements Mes remerciements vont à tous ceux qui ont permis la réalisation de cet ouvrage, en particulier mes collègues, professeurs au lycée La Martinière Duchère de Lyon avec qui j'ai travaillé avec beaucoup de plaisir en hématologie : Marie Claude Peyrot, qui m'a énormément aidé à débuter cet enseignement, Caroline Platroz et Stéphanie Darmochod, qui m'ont aidé efficacement à améliorer ces fiches techniques et qui ont relu l'ensemble des livrets. Un remerciement particulier à Christiane Robin, technicienne de laboratoire au lycée La Martinière Duchère de Lyon, qui a contribué avec compétence et gentillesse à la mise au point de techniques. Un remerciement aussi aux biologistes du laboratoire d'hématologie du Centre de Biologie Nord de Lyon, ainsi qu'à Madame Bizeul, technicienne cytologiste. Des remerciements également pour Gilles et Sangeetha Muller qui m'ont aidé pour la mise en page. La majorité des photographies des cellules sanguines et médullaires présentes dans les livrets 1 et 2 ont été reproduites avec l'aimable autorisation des responsables du site http://med2.univ-angers.fr . 2 CM © B1ABM Module 1 – Cytologie sanguine et médullaire Activités technologiques Avant-propos Ce livret 1 d'activités technologiques s'adresse aux étudiants de première année de section de technicien supérieur d'analyses de biologie médicale (B1ABM). Il correspond au module 1 des activités technologiques d'hématologie du référentiel 2008 du brevet de technicien supérieur d'analyses de biologie médicale. Ce livret 1 fait partie de quatre livrets relatifs aux enseignements technologiques d'hématologie de la section technicien supérieur d'analyses de biologie médicale. Livret 1 – Cellules normales du sang et de la moelle rouge des os Livret 2 – Hémopathies Livret 3 – Hémostase Livret 4 – Immuno-hématologie AOÛT AOÛT 2015 2015 B1ABM CM © 3 Sommaire Sommaire Préambules Préambules Risques biologiques et prévention au laboratoire d'hématologie et immunologie .................................. Utilisation du microscope.............................................................................................................................. 5 12 Chapitre 1 – Hémogramme Chapitre 1 – Hémogramme Introduction................................................................................................................................................... Hémogramme méthodes manuelles Fiche technique 1 – Hématocrite........................................................................................... Fiche technique 2 – Matériel pour numération manuelle des cellules.................................. Fiche technique 3 – Numération des hématies..................................................................... Fiche technique 4 – Dosage de l'hémoglobine..................................................................... Fiche technique 5 – Indices érythrocytaires......................................................................... Fiche technique 6 – Numération des leucocytes.................................................................. Fiche technique 7 – Frottis sanguin et coloration................................................................. Fiche technique 8 – Étude du frottis sanguin coloré............................................................ Fiche technique 9 – Morphologie des leucocytes................................................................. Fiche technique 10 – Interprétation de la formule leucocytaire........................................... Fiche technique 11 – Numération des plaquettes................................................................. Fiche technique 12 – Anomalies érythrocytaires.................................................................. Fiche technique 13 – Interprétation d'hémogrammes........................................................... Examens complémentaires à l'hémogramme Fiche technique 1 – Vitesse de sédimentation...................................................................... Fiche technique 2 – Numération des réticulocytes............................................................... Hémogramme automatisé Fiche technique 1 – Principes et résultats............................................................................. Fiche technique 2 – Pièges d'interprétation.......................................................................... Fiche technique 3 – Analyses de résultats d'automates cellulaires....................................... 19 23 27 33 37 39 43 47 55 61 65 67 71 83 85 91 97 110 113 Chapitre 2 – Myélogramme Chapitre 2 – Myélogramme Introduction – Généralités....................................................................................................................... Fiche technique 1 – Étude cytologique d'un frottis médullaire............................................. Fiche technique 2 – Lignée érythoblastique - les précurseurs.............................................. Fiche technique 3 – Lignée granuleuse neutrophile - les précurseurs.................................. Fiche technique 4 – Lignée granuleuse éosinophiles et basophiles - les précurseurs........... Fiche technique 5 – Lignée mégacaryocytaire – les précurseurs.......................................... Fiche technique 6 – Myélogramme et compte rendu............................................................ Annexe : Schéma de l'hématopoïèse............................................................................................... 121 125 127 131 135 139 143 146 4 CM © B1ABM Module 1 – Cytologie sanguine et médullaire Activités technologiques - Préambules - - Préambules - isques biologiques et prévention au laboratoire isques biologiques et prévention au laboratoire d'hématologie et d'immunologie d'hématologie et d'immunologie R R Le risque zéro n'existe pas, par conséquent tout le personnel de laboratoire doit savoir: repérer un risque l'évaluer le prévenir intervenir et réparer en cas d'accident. 1 - 1 - Identification du risque infectieux Identification du risque infectieux 1.1 - 1.1 - Agents infectieux transmissibles à l'homme par le sang ou les dérivés Agents infectieux transmissibles à l'homme par le sang ou les dérivés sanguins provenant de personnes contaminées. sanguins provenant de personnes contaminées.  Les agents infectieux majeurs sont des virus: virus des hépatites, principalement B (VHB) et C (VHC) virus de l'immunodéficience humaine (VIH) VIH VHB VHC Prévention vaccinale non oui non Prévalence de l'infection en France (2005)= nombre de personnes contaminées 110 000 300 000 700 à 800 000 Concentration virale (virions /mL) de sang chez une personne contaminée 101 à103 106 à1010 ? Taux de transmission - par voie transcutanée - par projection cutanéomuqueuse 0,3 % 0,04 % 6 à 40 % 2 à 4% Sources : INRS / GERES B1ABM CM © 5 RISQUES BIOLOGIQUES Risques biologiques et prévention  D'autres agents biologiques peuvent aussi être dangereux : -bactéries, -parasites sanguins, -champignons, -Agents à Transmission Non Conventionnelle (ATNC) ou prions. Ce sont des protéines infectieuses très résistantes aux procédés d'inactivation habituels (chaleur sèche, formol…). En l'état actuel de nos connaissances, ils ne semblent pas se transmettre par le sang mais peuvent se transmettre par contact de tissus contaminés (cf. sécurité au laboratoire de cytologie et d'histologie). 1.2 - 1.2 - Modes de transmission de ces agents infectieux Modes de transmission de ces agents infectieux Il existe 4 modes de transmission des agents infectieux à l'homme: par voie transcutanée et cutanéomuqueuse La plupart des agents infectieux ne traversent pas une peau saine, mais toute coupure ou micro-coupure est une porte d'entrée pour ces agents. Exemple de risque infectieux : piqûre par du matériel souillé (aiguille, pipette Pasteur en verre, bris de verre…) N.B. C'est le risque le plus grave de contamination. par inhalation d'aérosols C'est le mode de transmission le plus fréquent. Le risque est insidieux, car les aérosols ne sont pas visibles. Exemple de risques infectieux : inhalation d'aérosols lors de l'ouverture de tube de sang ou de plasma contaminé. par voie orale Étant donné l'interdiction absolue de pipeter à la bouche, la contamination est souvent due au fait de porter à la bouche des objets souillés (stylo …) ou des mains souillées. par projection vers la peau , les yeux ... Exemples de risques infectieux : projection de sang contaminé lors de la casse d'un tube, ou frottement de l'œil avec la main souillée. 6 CM © B1ABM . l'eau de Javel à 12 ° Cl diluée au 1/10 . l'alcool à 70° . le glutaraldéhyde à 2 % . le formol . la chaleur (30 min à 56 °C pour VIH) Retenir que ces virus sont détruits par : Mais ils ne sont pas détruits par: Exception : . les rayons U.V . , les rayons gamma . la congélation Virus de l’hépatite B qui resiste à de nombreux traitements, d’où la nécessité d’être vacciné Temps de contact 5 à 10 min Module 1 – Cytologie sanguine et médullaire Activités technologiques 1.3 - 1.3 - Procédures à risques Procédures à risques 2 - 2 - Démarche de prévention Démarche de prévention Cette démarche doit être collective pour une protection de tous. 2.1 - 2.1 - Vaccinations obligatoires pour les professionnels de la santé Vaccinations obligatoires pour les professionnels de la santé Loi 91-73 du 18 janvier 1991 Toute personne qui dans un établissement ou organisme public ou privé de prévention ou de soins, exerce une activité professionnelle l'exposant à des risques de contamination, doit être immunisée contre: - BGC - l'hépatite B (rappel en fonction du taux d'Anticorps) - la diphtérie, le tétanos, la poliomyélite (vaccin à 2-4 mois, 11 mois, 6 ans, 11-13 ans puis rappel à 25 ans, 45 ans, 65 ans puis tous les 10 ans) - la fièvre typhoïde (rappel tous les 3 ans pour les personnels de laboratoire). De même pour tout étudiant d'un établissement préparant à l'exercice des professions de santé. Décret du 5 septembre 1996: Obligation vaccinale avec le BCG des élèves, personnels de laboratoire d'analyses médicales. B1ABM CM © 7 Qui est concerné ? L'acheminement du prélèvement Quels risques majeurs ? Patient Prélèvement Transport Réception au laboratoire Analyse Élimination des déchets Infirmières Médecins Techniciens Agents Secrétaires Techniciens Agents d'entretien Services extérieurs Piqûre avec une aiguille souillée Coupure, contact Coupure, piqûre, contamination orale, par projection Ramassage Piqûres, coupures, contamination orofécale.. Le risque existe à chaque étape Il n'existe pas de vaccin contre le VIH et le VHC Risques biologiques et prévention 2.2 - 2.2 - Origine des produits sanguins utilisés au lycée Origine des produits sanguins utilisés au lycée Une convention cadre sur le sang a été élaborée entre le ministère de l'éducation nationale et l'agence française du sang (14-4-1994). Les échantillons de sang sont fournis par le centre de transfusions. – Ils proviennent de donneurs prélevés dans des conditions conformes aux bonnes pratiques de prélèvement. – Ils ont été soumis aux tests de dépistages suivants : • recherche des anticorps anti-VIH • recherche des anticorps anti-VHC • recherche des antigènes HBs et des anticorps anti-HBc correspondant au VHB • recherche des anticorps anti-HTLV I et II (virus des leucémies humaines à lymphocytes T) • recherche uploads/Philosophie/livret-1.pdf