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Pr agrégé Emira Kaouech Akouri Laboratoire de Parasitologie-Mycologie CHU La Ra

Pr agrégé Emira Kaouech Akouri Laboratoire de Parasitologie-Mycologie CHU La Rabta http://www.infectiologie.org.tn http://www.infectiologie.org.tn Candidose oro-pharyngée Cryptosporidiose Cryptococcose- Toxoplasmose- LV- Pneumocystose Microsporidiose Aspergillose http://www.infectiologie.org.tn http://www.infectiologie.org.tn http://www.infectiologie.org.tn http://www.infectiologie.org.tn Écouvillonnage de la langue Biopsie œsophagienne http://www.infectiologie.org.tn candidose oro-pharyngée Examen direct: Levures ± pseudofilaments  Culture: Sabouraud - Chloramphénicol et Sabouraud -Chloramphénicol- Actidione http://www.infectiologie.org.tn  Étude de l’assimilation des sucres Tests enzymatiques candidose oro-pharyngée Identification des levures Candida spp. Candida albicans  Test de Blastèse  Test de chlamydosporulation http://www.infectiologie.org.tn Résultats du service de Parasitologie- Mycologie La Rabta : 107 pvts langue 76 + (71%) C.albicans : 50-93% C.glabrata, C. tropicalis, C. parapsilosis, C.krusei, C.lusitaniae, C.dubliniensis http://www.infectiologie.org.tn http://www.infectiologie.org.tn Giardiose Coccidioses intestinales Microsporidiose http://www.infectiologie.org.tn Giardiose Selles +++ ( 3 prélèvements répétés ⇒ sensibilité =90% )  Après enrichissement par une technique de concentration (expl: technique de Faust)  Examen direct (état frais) Kystes Formes végétatives Giardia intestinalis http://www.infectiologie.org.tn • Cryptosporidiose • Isosporose • Cyclosporose http://www.infectiologie.org.tn Cryptosporidiose  Selles +++ (prélèvements répétés ):  liquide d’aspiration duodénale, bile, lavage bronchioloalvéolaire COCCIDIOSES INTESTINALES Cryptosporidium parvum Cryptosporidium hominis Oocystes ⇒ Coloration au Ziehl Neelsen modifiée +++  Immunofluorescence directe Selle ⇒ technique de concentration (expl: technique de Ritchie). http://www.infectiologie.org.tn Isosporose Selles +++ (prélèvements répétés ): Examen direct (état frais) Méthode de Kato après enrichissement par une technique de concentration (expl: technique de Faust / technique de Ritchie) COCCIDIOSES INTESTINALES Isospora belli Oocystes Cristaux de Charcot Leyden  Coloration au Ziehl Neelsen modifiée +++ http://www.infectiologie.org.tn Cyclosporose COCCIDIOSES INTESTINALES Cyclospora cayetanensis Oocystes Selles +++ (prélèvements répétés ): Examen direct (état frais) après enrichissement par une technique de concentration (expl: technique de Faust / technique de Ritchie)  Coloration au Ziehl Neelsen modifiée +++ Parasitose tropicale émergente http://www.infectiologie.org.tn CRYPTOSPORIDIOSE 397 selles 44 + (11%) Rev Tun Biol Clin (22) 2009 ISOSPOROSE 397 selles 5 + (1,25%) Maghreb médical 25 (376) 2005 http://www.infectiologie.org.tn MICROSPORIDIOSE Enterocytozoon bieneusi (1985) Encephalitozoon intestinalis (1993) Vittaforma sp. (J Eukaryot Microbiol 2003)  Amplification génique (PCR) Cibles spécifiques du phylum ou de l’espèce SD= 102 spores/ml Carnevale et al. Clinical And Diagnostic Laboratory Immunology. 2000 ⇒Coloration trichromique de Weber SD= 104 spores/ml  Selles +++ (prélèvements répétés ): liquide d’aspiration duodénale, bile, lavage bronchioloalvéolaire Selle ⇒ technique de concentration (expl: technique de Ritchie). http://www.infectiologie.org.tn Rev Tun Biol Clin (22) 2009 276 selles 11+ (3,98%)  Pathologie Biologie 59 (2011) 234–239 35 selles 7+ ( PCR Enterocytozoon bieneusi 7+/ Coloration de Weber 3+) (20%) http://www.infectiologie.org.tn http://www.infectiologie.org.tn Pneumocystose Pneumocystis jiroveci , Frenkel (1999) (P. carinii sp hominis) LBA +++ Expectoration induite ⇒ 25 à 67% Technique de Gomori-Grocott modifié par Musto Technique de coloration au May Grünwald Giemsa  Immunofluorescence directe Flori P et coll. J. Med. Microbiol. 2004; 53, 603-607. Sing A et coll. J. Clin. Microbiol. 2000; 38, 1461-1467. http://www.infectiologie.org.tn  PCR en temps réel ⇒ charge parasitaire Pneumocystose Latouche et coll . Rev. Fr. labo. 2000 ; 320, 63-69. Durand et coll. FEMS Immun. Microbiol. 2005; 45, 405-410 Turner et coll. Eur. Respir. J. 2003, 21, 204-208.  PCR en point final ⇒ prélèvements invasifs (sensibilité 88%)/ prélèvements non invasifs (sensibilité 75%) détection de faibles quantités d’ADN (0,5-1 ng/µl) http://www.infectiologie.org.tn Rev Tun Biol Clin (22) 2009 200 pvts bronchopulmonaires 26+ (13%)  Pathologie Biologie 57 (2009) 373–377 15 cas + 11 VIH + ( PCR 10+ (pvts invasifs et superficiels/ Colorations 5 LBA+) http://www.infectiologie.org.tn Autres infections opportunistes rares http://www.infectiologie.org.tn PORTE D’ENTRÉE PULMONAIRE Toxoplasmose MYCOSES INVASIVES Histoplasmose ( de retour de voyage)  Aspergillose (stade terminal du SIDA)  Cryptococcose LOCALISATION RARE http://www.infectiologie.org.tn Diagnostic radiologique http://www.infectiologie.org.tn Toxoplasmose Polymerase Chain Reaction: Gènes cibles : B1, AF PCR en point final (Rapidité de réponse (1 à 2 jours) PCR en temps réel (charge parasitaire) Toxoplasma gondii LCR +++ , sang  Inoculation à l’animal  Culture cellulaire: Rapidité de réponse (3 à 6 jours) Adaptée à la recherche http://www.infectiologie.org.tn  671 VIH+ colligés de 1987 à 2007 56 Cas (8,34%) (examens radiologiques) Résultats du service des Maladies Infectieuses La Rabta : (1987-2007) Rev Tun Biol Clin (22) 2009 http://www.infectiologie.org.tn http://www.infectiologie.org.tn  Autres formes cliniques LBA, liquide d’abcès, biopsies cutanées Cryptococcose Cryptococcus neoformans  CNM +++ LCR +++ ⇓ Méningite à liquide clair, lymphocytaire, hypo-glycorachie, hyper-albuminorachie http://www.infectiologie.org.tn Cryptococcose Cryptococcus neoformans Centrifugation du LCR culot surnageant http://www.infectiologie.org.tn Méd. Mal Infect (39) 2009 914-919 174 VIH+ 16 cas (incidence 9,19%) (1991-2006) dont 6 cas inauguraux du SIDA http://www.infectiologie.org.tn http://www.infectiologie.org.tn Dermatose cosmopolite prurigineuse et contagieuse (Prurit absent chez le VIH+) La gale Sarcoptes scabiei pvt cutané (grattage des sillons scabieux) http://www.infectiologie.org.tn http://www.infectiologie.org.tn Leishmaniose viscérale Rare en Tunisie Symptomatologie inhabituelle : pulmonaire, digestive… Fièvre+++ Leishmania infantum prélèvements : Moelle osseuse (prélèvement de référence Sang périphérique prélevé sur anticoagulant (sur citrate de Na+) Biopsie http://www.infectiologie.org.tn Culture sur milieux spécifiques (Milieu Novy Mc Neal Nicolle) forme promastigote Leishmaniose viscérale Leishmania infantum  Examen direct (MGG) Forme amastigote http://www.infectiologie.org.tn Leishmaniose viscérale PCR en temps réel SD= 0,0125 parasites /ml Mary et al. J Clin Microbiol 2004 Leishmania infantum PCR en point final SD = 0,12 – 22,5 p/ml Piarroux R. et al. J Clin Microbiol 1994 Mathis et Deplazes J Clin Microbiol 1995 Costa J.M. et al JClin Microbiol 1996 Spanakos et al. Molecular Cell Probes 2002 http://www.infectiologie.org.tn Rev Tun Biol Clin (22) 2009 338 pvts (sang ou moelle osseuse) 12 cas+ (3,55%)  Pathologie Biologie 55 (2007) 521–524 25 VIH + 17 cas de portage asymptomatique ( PCR sur sang périphérique) http://www.infectiologie.org.tn Incidence des infections opportunistes chez le patient adulte infecté par le VIH Pozio E. Parassitologia. 2004. 46(1-2):89-93 Trends in Parasitology . 2005. 21,2,58-63. 1994 1995 1996 1997 1998 1999 2000 2001 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 Incidence pour 1000 personnes/an HAART Pneumocystose COP CNM Toxoplasmose http://www.infectiologie.org.tn AVANT HAART 27 cas de Cryptosporidiose 2 cas de Microsporidiose 0 cas d’Isosporose 15 cas de Pneumocystose 18 cas de CNM 35 cas de Toxoplasmose 4 cas de LV APRÈS HAART 16 cas de Cryptosporidiose 9 cas de Microsporidiose 5 cas d’Isosporose 11 cas de Pneumocystose 1 cas de CNM 21 cas de Toxoplasmose 8 cas de LV Rev Tun Biol Clin (22) 2009 Cas inauguraux http://www.infectiologie.org.tn http://www.infectiologie.org.tn Filaments mycéliens http://www.infectiologie.org.tn Les mycoses et parasitoses opportunistes sont nombreuses au cours du Sida ⇒ doivent être initialement évoquées devant tout signe d’appel chez tout VIH+ malgré la non spécificité des manifestations cliniques ⇒ leur diagnostic constitue une urgence http://www.infectiologie.org.tn Le diagnostic parasitologique et/ou mycologique les colorations spécifiques la biologie moléculaire (PCR)  M.E.E du micro-organisme et/ou de son ADN  Suivi post-thérapeutique http://www.infectiologie.org.tn http://www.infectiologie.org.tn uploads/Science et Technologie/ e-kaoueche.pdf