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الج ـــ م ـــ هوري ـــــ ة الجزائري ـــ ة الديمق ــــــ راطي ــ ة الش ـــ ع ــــ بية République Algérienne Démocratique et Populaire DEPARTEMENT DE PHARMACIE THÈME : Evaluation de l’activité antioxydante et antimicrobienne des huiles essentielles de deux plantes aromatiques de la région de Tlemcen. Présenté par : Guezzen Lotfi Soutenu le : 11/07/2019 Le Jury Président : Pr.Abbad.S Maitre de conférences en génie pharmaceutique. Faculté de médecine de Tlemcen. Membres : Dr.Gana F.Z Maitre assistante en pharmacie technologique. Faculté de médecine de Tlemcen. Dr.Boukenkoul.W Maitre assistante en hémobiologie et transfusion sanguine . Faculté de médecine de Tlemcen. Encadreur : Dr.Kaddour.F Maitre assistante en pharmacie technologique. Faculté de médecine de Tlemcen. Co-encadreur: Dr.Aissaoui.N Docteur en microbiologie. MINISTERE DE L’ENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE UNIVERSITE ABOU BEKR BELKAÎD FACULTE DE MEDECINE DR. B. BENZERDJEB - TLEMCEN وزارة الــــــــــتعـــليم العــــالــــــــــــي والبـــحث العـــــــــــــــلمـــــــــي جــامعة أبو بكــر بلـقـا يد كـليــة الطب تلمســان – د. ب. بن زرجــب MEMOIRE DE FIN D’ETUDES POUR L’OBTENTION DU DIPLOME DE DOCTEUR EN PHARMACIE LOUANGE À ALLAH Le tout puissant, le miséricordieux Le clément de nous avoir accordé la vie, la santé, la force, et la patience d’aller Jusqu’au bout du rêve. A cœur veillant rien d’impossible A conscience tranquille tout est accessible Quand il y’a la soif d’apprendre Tout vient à point à qui sait attendre Quand il y’a le souci de réaliser un dessin Tout devient facile pour arriver à nos fins Malgré les obstacles qui s’opposent En dépit des difficultés des qui s’interposent Les études sont avant tout Notre unique et seul atout Ils représentent la lumière de notre existence L’étoile brillante de notre jouissance Comme un vol du gerfaut hors du charnier natal Nous partons ivres d’un rêve héroïque et brutal Espérant des lendemains épiques Un avenir glorieux et magique Souhaitons que le fruit de nos efforts fournis Jours et nuit, nous mènera vers le bonheur fleuri Aujourd’hui, ici rassemblés auprès des jurys Nous prions dieu que cette soutenance Fera signe de persévérance Et que nous serions enchantés par notre travail honoré. Je dédie cet événement marquant de ma vie à… A mes très chers parents Voici le jour que vous avez attendu impatiemment. Aucun mot ne saurait exprimer ma profonde gratitude et ma sincère reconnaissance envers les deux personnes les plus chères à mon cœur. Vos prières, vos sacrifices et votre soutien inconditionné m'ont comblé tout au long de mon existence. J'espère avoir répondu aux espoirs que vous avez fondés en moi. Que Dieu tout puissant vous procure la santé, le bonheur et la prospérité. A mes très chère frère, et sœur Merci de m’avoir accompagné pendant toute ma vie, d’être toujours là pour moi. Je vous aime tous. Qu’Allah le tout puissant, vous protège et vous exhausse tous vos vœux. A mes oncles, tantes, cousins et cousines Merci pour votre aide, vos encouragements, vos prières m’ont toujours été d’un grand secours. Puisse Dieu, le tout puissant vous préserver du mal, vous combler de santé, de bonheur et vous procurer une longue vie. À mes très chers amis M.Djellad A.Youssef B.Ramzi Y.Sari hassoune B. N.Achour talet M.Abdelaoui A.Ghomari en témoignage de l’amitié qui nous unie et des souvenirs que nous avons passés ensemble, je vous souhaite une vie pleine de santé et de bonheur. A la personne qui était toujours a mes cotes pour me soutenir B.Benmansour. A mes collègues de la promotion de pharmacie 2013 Pour toute l’aventure qu’on a vécue ensemble durant les six dernières années, je vous félicite pour votre patience, soutien et fidélité. G. lotfi REMERCIEMENTS Je tiens tout d'abord à remercier Dieu le tout puissant, qui m’a donné la force et la patience d'accomplir ce modeste travail. Je tiens à exprimer mon profonds remerciements À mon encadreur Dr F.Kaddour pour tous les efforts fournis afin de mener à terme notre mémoire. À A mon co-encadreur Dr N.Aissaoui je vous suis très reconnaissantes de votre collaboration avec nous pour l‘accomplissement de ce travail. Á mon présidente de jury Pr.S.Abbad je vous remercions humblement d’avoir accepté de le juger Veuillez trouver ici, le témoignage de notre admiration et de notre respect. Mos remerciements va également aux membres du jury : Dr W.Boukenkoul et Dr FZ.Gana qui nous font l’honneur de juger ce travail, de l’examiner et de l’enrichir par leurs connaissances et leurs propositions. Je tiens à exprimer mon gratitude Au Pr Nabil Borsali, au Dr Souad Guendouz et au Dr Souhila Guendouz au Dr Amira Iles pour leurs conseils et aide indispensables. Vous trouverez ici l’expression de mon profond Respect et reconnaissance. Au Dr BORSALI Nabil et au Dr SEDJELMACI Nesrine de nous avoir conseillées, guidées et motivées. Enfin nos sincères gratitudes à tous les enseignants du département de pharmacie qui nous ont suivi tout au long du cursus. 1 Table des matières Liste des abréviations ............................................................................................................... 7 Introduction .............................................................................................................................. 8 ETUDE BIBIOGRAPHIQUE ............................................................................................... 10 CHAPITRE I : ........................................................................................................................ 11 PHYTOTHERAPIE ET AROMATHERAPHIE ................................................................ 11 I. Phytothérapie ...................................................................................................................... 12 I.1. Définition de la phytothérapie ........................................................................................ 12 I.2.Métabolites secondaires des plantes dans la découverte des médicaments .................... 13 II. Aromathérapie ................................................................................................................... 14 II.1. Définition de l’aromathérapie ....................................................................................... 14 II.2. Historique de l’usage des plantes aromatiques ............................................................. 15 II.3. L’apparition de l’aromathérapie moderne ................................................................... 16 III. Huile essentielle ................................................................................................................ 17 III.1. Historique .................................................................................................................... 17 III.2. Définition et caractéristiques des huiles essentielles ................................................... 19 III.3. Importance économique des huiles essentielles .......................................................... 20 III.4. Principaux domaines d’application ............................................................................. 22 III.6. Fonction de l’huile essentielle dans la plante .............................................................. 25 III.7. Composition chimique ................................................................................................. 25 III.8. Facteurs influençant la composition chimique ............................................................ 32 III.8.1. Les facteurs extrinsèques ..................................................................................... 33 III.8.2. Facteurs intrinsèques ............................................................................................ 34 III.9. Les chémotypes des huiles essentielles ....................................................................... 35 III.10. Les techniques d’extractions des huiles essentielles ................................................ 35 III.10.1. Méthodes conventionnelles et classiques ............................................................ 36 a. Hydro-distillation .......................................................................................................... 36 b. Hydro-distillation à la vapeur ....................................................................................... 37 c. Distillation à la vapeur .................................................................................................. 37 d. L’hydro-diffusion : ........................................................................................................ 38 f. Pression à froid .............................................................................................................. 38 2 g. L’enfleurage : ................................................................................................................ 39  L'enfleurage à froid .................................................................................................... 39  L'enfleurage à chaud .................................................................................................. 39 III.10.2. Méthodes innovantes d’extraction des huiles essentielles .................................. 40 a. Extraction au CO2 supercritique .................................................................................... 40 b. Extraction assistée par ultrasons ................................................................................... 41 c. Extraction au CO2 sub-critique : .................................................................................... 41 d. Hydro-distillation par micro- ondes sous vide .............................................................. 41 III.11. Méthodes d'identification chimique des huiles essentielles ..................................... 42 a. Le couplage CPG-SM ....................................................................................................... 43  Principe ...................................................................................................................... 45 III.12. Propriétés biologiques et pharmaceutiques ............................................................ 46  Activité antimicrobienne ........................................................................................... 46 Il a été constaté que la gravité des infections bactériennes a augmenté et cela .................... 46  Activité antifongique ................................................................................................. 48 Activité antivirale : ............................................................................................................... 48  Activité antiparasitaire ............................................................................................... 49  Propriétés antioxydantes ............................................................................................ 49  Activité anti-inflammatoire ....................................................................................... 49  Activité antalgique et analgésique ............................................................................. 50  Activité spasmolytique .............................................................................................. 51 III.13. Toxicité des huiles essentielles .................................................................................. 52 III.14. Critère de qualité ....................................................................................................... 54 II.15. Les conditions de conservation et de stockage .......................................................... 54 Chapitre 2 : Monographies des ............................................................................................. 56 Plantes étudiées ....................................................................................................................... 56 I.1.Thym: Thymus ciliatus .................................................................................................... 57 I.1.1.Nomenclature et taxonomie ...................................................................................... 57 I.1.2. Description botanique .............................................................................................. 57 I.1.3.Répartition géographique.......................................................................................... 58 I.1.4. Composition de l’huile essentielle ........................................................................... 58 I.1.5.Utilisation traditionnelle ........................................................................................... 59 I.1.6. Activité biologique .................................................................................................. 59 II.2.1. Nomenclature et taxonomie.................................................................................... 59 3 II.2.3 Répartition géographique ........................................................................................ 60 II.2.4. Composition de l’huile essentielle ......................................................................... 61 II.2.5. Usage ...................................................................................................................... 61 Partie pratique ........................................................................................................................ 62 MATERIEL ET METHODES .............................................................................................. 63 I. Introduction ......................................................................................................................... 64 II. Matériels et Méthodes ....................................................................................................... 64 II.1. Matériel végétal .............................................................................................................. 64 II.1.1. Origine géographique et période de récolte de la plante ........................................ 64 II.1.3. Préparation du matériel végétal ............................................................................. 65 II.1.4. Extraction d’huile essentielle ................................................................................. 66 II.2.1.Evaluation de l’activité antioxydante ...................................................................... 67  Méthode de réduction du radical libre DPPH ............................................................ 67 II.2.2. Evaluation de l’activité antimicrobienne ................................................................ 69  Activité antibactérienne ....................................................................................... 69 a. Souches utilisées ......................................................................................................... 69 b. Technique de diffusion sur gélose ................................................................................ 69 c. Méthode de microdilution sur milieu liquide ................................................................ 70  Activité antifongique:........................................................................................... 71 a.Souches utilisées ............................................................................................................ 71 b. Technique de diffusion sur gélose ................................................................................ 71 c. Détermination de la concentration minimale inhibitrice ............................................ 72 RESULTATS ET DISCUSSION .......................................................................................... 74 III.1. LE RENDEMENT DES HES ...................................................................................... 75 III.2. Propriétés organoleptiques des HEs ............................................................................ 76 III.3.Evaluation de l’activité antioxydante des huiles essentielles par la méthode de réduction du radical libre DPPH ........................................................................................... 77 III.4.1.Evaluation de l’activité antimicrobienne des huiles essentielles par la méthode de diffusion des disques ......................................................................................................... 83 III.4.2.Détermination des Concentrations Minimales Inhibitrices (CMI) des huiles essentielles par la méthode des plaques de microtitration. ............................................... 87 Annexe ..................................................................................................................................... 94 REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES ............................................................................. 96 4 Liste des tableaux Tableau I: La production des huiles essentielles dans le monde .............................................. 22 Tableau II: Classification de l'espèce Thymus ciliatus coloratus ............................................. 57 Tableau III: Classification de l'espèce origanum vulgare ........................................................ 59 Tableau IV: Paramètres géographiques du thym et de l'origan utilisés ................................... 65 Tableau V: Souches utilisées pour l’étude de l’activité antibactérienne .................................. 69 Tableau VI: Rendement des HEs ............................................................................................. 75 Tableau VII:: L’activité scavenger du radical DPPH par l’HE d’O.vulgare l’HE de Thymus ciliatus uploads/Sante/ evaluation-de-l-activite-antioxydante-et-antimicrobienne-des-huiles-essentielles-de-deux-plantes-aromatiques-de-la-region-de-tlemcen.pdf