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Boites de Pétri (1) avec des levures après une semaine de culture 2021 2022 Les

Boites de Pétri (1) avec des levures après une semaine de culture 2021 2022 Les effets redoutables des UV sur les êtres vivants Exemple : La conséquence de la mutation de la levure S. cerevisiae ADE2 Année 2021-2022 1 Sommaire 1. Introduction p.3 2. Développement 2.1 Protocole expérimental + schéma p.4 et 5 2.2 Résultat p.6 2.3 Interprétation p.7 3. Conclusion p.8 4. Lexique p.9 5. Bibliographie p.10 2 1. Introduction Depuis la mode des peaux bronzés, des cancers se développent à cause des effets des UV. Dans cette expérience, nous avons réalisé des cultures de levure et nous avons pu observer les conséquences des UV sur celles-ci. Nous avons travaillé sur la levure S. cerevisiae ADE 2 dans une salle aseptisé, c’est-à-dire, complétement désinfectée. Nous étions dans un lycée et non pas dans un laboratoire. En quoi les UV ont-ils un effet néfaste sur l’ADN ? Les levures sont des champignons microscopiques, qui se trouve partout dans la nature, unicellulaire de forme ovoïde ou sphérique et ce sont des organismes vivants. Tout comme celles de l’homme, les cellules de levures sont vivantes et naturelles. Elles ont besoin d’air pour se multiplier, mais l’absence d’air n’est pas non plus sans conséquence sur leur développement. La cellule de levure a la forme d’un œuf et elle est visible qu’au microscope. En effet, sa taille ne dépasse pas les 6 à 8 millièmes de millimètre. À noter qu’un cube de 1 cm de côté pèse environ 1 g et renferme, à lui seul 10 milliards de cellules vivantes de levure. Le gène Ade2 intervient dans la synthèse (2) de l’adénine (3). Lorsque ce gène est muté (souche Ade2-) la synthèse d’adénine est bloquée ce qui conduit à l’accumulation d’un composé rouge dans la cellule. Dans le cas d’un organisme pluricellulaire, toutes les cellules sont susceptibles de subir une mutation et celle-ci peut entraîner plusieurs conséquences. - Conduis à la mort de la cellule. - Conduis à un dysfonctionnement de la cellule qui peut provoquer sa prolifération (4) incontrôlée : c’est la cancérisation. - Conduis à la modification non-létale (5) d’un caractère. Les mutations somatiques ont lieu dans les cellules somatiques (5) de l’organisme, elles ne sont pas héréditaires et les mutations germinales ont lieu dans le génome (7) des cellules germinales (8), elles peuvent être transmises à la descendance de façon totalement aléatoire. Étant donné les fréquences des mutations observées, on estime à 10 le nombre moyen de mutations présentes dans chaque cellule reproductrice. Parfois, la mutation est silencieuse et n’a aucun impact sur la survie et sur le fonctionnement de la cellule et de ses descendantes. Dans un premier temps, nous allons décrire le protocole expérimental permettant de réaliser cette expérience avec un schéma dynamique, suivi du matériel utilisé. Dans un second temps, nous allons Cicatrice de bourgeonnement Paroi Mitochondrie Nucléaire Membrane Noyau Cytoplasmique Membrane Cytoplasme Schéma de la cellule de levure (diamètre = 8 microns) voir nos résultats avec un graphique puis dans un dernier temps, nous allons faire l’interprétation des résultats obtenus. 2. Développement 2.1 Protocole expérimental Toute expérience faite dans une salle aseptisée nécessite de s’attacher les cheveux, de mettre une charlotte et de porter une blouse propre. Avant de commencer, veillez à nettoyer le poste de travail à la javel et les mains à l’alcool. Tout le matériel utilisé qui sera au contact des levures et des boîte de Pétri doit être stérile. Avant tout, allumer les 3 bougies et former un triangle avec pour empêcher les bactéries de pénétrer dans les boites de Pétri manipulées. Ensuite, verser de l’eau distillée dans un tube à essai et ajouter les levures tout en restant au-dessus des 3 bougies. Puis refermer le tube à essai et secouer pendant 2 minutes. Ensuite, verser 5 gouttes de votre solution au centre d’une boite de Pétri à l’aide d’une pipette puis répartir les levures de façon circulaire à l’aide d’un étaleur en forme de L. Refermer la boite puis répéter cette action 4 fois. Notez ensuite sur le couvercle des boites de Pétri le temps que celles-ci vont être exposées aux UV à l’aide d’un marqueur indélébile. Par la suite, amener les 5 boites de Pétri devant la boite à UV. Régler la lampe à UV sur ʎ=365 nanomètre, puis placer vos boites de Pétri sans le couvercle dans la boite à UV tout en respectant le temps noté sur le couvercle de celles-ci et une fois le temps d’exposition atteint, enlever la boite de Pétri concernée et refermer là. Ramener Le matériel utilisé sera le suivant : - 5 boites de pétrie - Un flacon d’eau de javel - De l’eau distillé - Un briquet - 3 bougies - Un porte tube à essai - Un tube à essai - Une pipette - Un étaleur (en forme de L) - Une aiguille lancéolée (9) - Des bandes adhésives extensibles - Un marqueur indélébile 4 toutes les boites à leur place et pour finir, refermer les boites à l’aide de bandes adhésives extensibles. Schéma du protocole expérimental Après 15 jours, récupérer les 5 boites de Pétri avec les cultures de levure et compter le nombre de colonies sur 1cm² puis extrapoler cette valeur pour l’ensemble de la culture. Légende du schéma Renouveler l’opération pour chaque boîte et interpréter les résultats obtenus dans un tableau pour pouvoir par la suite, faire des graphiques détaillés. 2.2 Résultats Les résultats suivants ne sont pas nos résultats, car en vue de la contamination de nos cultures, le comptage des colonies n’a pas pu être effectué. 2.3 Interprétation Dans le premier graphique, nous verrons l’évolution des colonies blanche et rouge en fonction du temps d’exposition aux UV. Nous observons alors que pour la première boite de Pétri qui n’a pas été soumise aux UV, elle comporte 10 colonies blanches et 500 colonies rouges. Ensuite, pour la deuxième boite de Pétri qui a été exposée 30 secondes aux UV, nous voyons qu’il y a 7 colonies blanches et 100 colonies rouges. Pour la troisième boite qui a été exposée 45 secondes aux UV, nous observons qu’il y a 3 colonies blanches et 30 colonies rouges. Puis, pour la quatrième boite qui a été exposées 80 secondes aux UV, nous voyons qu’il y a 1 colonie blanche et 5 colonies rouges. Nous pouvons alors dire qu’en fonction du temps exposé aux UV, le nombre de colonies diminue. Plus le temps d’expositions est long, moins il y a de colonies. Dans le second graphique, nous verrons l’évolution du nombre de colonies blanches en pourcentage en fonction du temps d’exposition aux UV. Lorsque qu’une boite de Pétri n’est pas exposée aux UV, il n’y a que 0,5 % de colonies blanches. Quand le temps d’exposition est de 30 secondes, il y a 7 % de colonies blanches, à 45 secondes d’exposition, il y a 10 % de colonies blanches et pour finir, lorsqu’une boite de Pétri est exposée pendant 80 secondes aux UV, il y a 20 % de colonies blanches. Nous pouvons alors dire que plus le temps d’exposition aux UV est long, plus le nombre de colonies blanches en pourcentage augmentent. 6 Boite de pétrie non exposée aux UV après 2 semaines de culture. 3. Conclusion Durant cette expérience, nous avons pu voir que les UV peuvent réparer certaines cellules, car les cellules de levure S.cerevisiae ADE 2 sont normalement de couleur blanche, mais à cause d’une absence d’une quantité suffisante d’Adénine dans le milieu, la levure a accumulé un produit intermédiaire de couleur rose/rouge. Et nous avons vu que plus leur temps d’exposition aux UV était long, plus les cellules de levure étaient à nouveau de couleur blanche. Ce phénomène est rare, car comme nous avons pu le voir, le nombre de colonies diminue à cause des UV, mais la quantité de colonies blanche augmente par rapport au nombre de colonies rouge. Nous pouvons alors dire que les UV ont des effets positifs comme une mutation bénéfique ou des réparations et des effets négatifs comme la modification non-létale d’un caractère et la cancérisation. Les UV ont aussi un effet délétère (10) qui provoque la mort des cellules. Les rayons ultraviolets entraînent la formation de liaisons covalentes (11) entre deux nucléotides qui se suivent. Cela créer une modification de la structure de l’ADN qui va perturber le fonctionnement normal de l’ADN-polymérase (12) au moment de la réplication. De plus, les rayons UV entraînent l'apparition de cancers de la peau. Ils provoquent des mutations dans l’ADN des cellules (de la peau), qui sont suivies d'une multiplication anarchique de ces cellules et finalement l’apparition de tumeurs cancéreuses. Voici les résultats que nous aurions dû avoir pour la boite témoin qui n’a pas été exposée aux Rayons ultraviolets. 7 Mais les mutations ne sont pas toujours négatives. Par exemple, toutes les espèces vivantes viennent du même ancêtre. Cet ancêtre s’appelle Pikaia et il a subi différentes mutations pour créer tous les êtres vivants qui ont existé et qui existent encore aujourd’hui. 4. Lexique (1) Boite de pétri : Petite boite cylindrique transparente uploads/s3/ rapport-microbiote 1 .pdf