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Chapitre 1= place de l’anatomie et de la cytologie pathologiques en médecine -d

Chapitre 1= place de l’anatomie et de la cytologie pathologiques en médecine -définition= c’est l’étude des lésions ou modifications morphologiques induites au nv de l’organisme par des états morbides حالة مرضية. Peuvent être des lésions induites par agent d’agression ou au contraire liées aux réactions de l’organisme à cet agresseur. Peuvent intéresser un organite, un type cellulaire ou un tissu. -perspectives futures= Banques de tissus congelées à -80ﹾ= tumorothèques en vue de nouvelles techniques futures La numérisation des lames Emergence de la télé pathologie -quel est le rôle de l’Anapath? Carrefour entre le diagnostic, le pronostiqueالتكهن la thérapeutique, la prévention, l’expérimentation. -le diagnostic= Etude des lésions macroscopiques et microscopiques= élaboration du diagnostic= pathologie inflammatoire, tumorale bénigne, maligne… Exp=le diagnostic d’un cancer peut être soupçonné par la clinique ou l’imagerie, mais il n’est confirmé que par l’examen anapath. -le pronostique= En pathologie tumorale maligne via= -l’étude des limites d’exérèse -le grade=évaluation atypies cytonucleaires, -le stade de la prolifération tumorale notamment par la classification internationale histo- pronostique p.T.N.M -marqueurs tumoraux prédictifs - La quantification توضيح de la réponse thérapeutique= Exp en cancérologie mise en évidence de la disparition ou la persistance ou l’aggravation des lésions en cours de traitement cas de la chimiothérapie néo adjuvante. -la recherche= -contribution à une meilleure compréhension des mécanismes intimes des maladies= progression des connaissances médicales. QUELS SONT LES MOYENS DE L’ANAPATH ? -prélèvement = cytologiques et biopsiques -démarche anapath= techniques de cytologie et d’histologie A-La cytopathologie= examen non invasif, peu de moyens, non couteuxز 1-les prélèvements= Méthodes=raclage, brossage, écouvionage, lavage, ponction à l’aiguille fine améliorée par écho guidage. Types= LCR, ascite, frottis cervico-vaginaux, liquide de ponction, urines, crachats… But= diagnostic d’un processus tumoral= exp= Liquide pleural= cellules malignes d’un KC métastatique Ponction mammaire= KC du sein Un FCV= KC du col utérin ….. Dépistage de lésions précancéreuses dont le traitement évite la survenue d’un KC Diagnostic d’un processus inflammatoire exp= une TBC 2- la démarche anapath= Si prélèvement solide= Le culot est étalé sur lames puis fixé immédiatement à l’éthanol liquide 90ﹾ ou par cyto spray pour éviter la cytolyse cellulaire. Au labo d’anapath les lames sont étiquetée puis colorées au Papanicolaou ou HES ou MGG, ou coloration spéciale. Lecture et interprétation des lésions au microscope par le médecin anapath qui établit un compte rendu descriptif et diagnostic adressé au médecin prescripteur avec classification en vigueur exp= classification de Bethesda. Pour la thyroïde .pour le FCV Si prélèvement liquide = Fixation immédiate à l’éthanol 90ﹾ 2/3 pour 1/3 de ponction Au labo d’apalath = examen macroscopie centrifugation étalement coloration lecture interprétation et compte rendu. B-Histopathologie = 1-prélèvement ou biopsies= Ponction biopsies et micro biopsies exp= foie, sein, avec grosse aiguille ou au pistolet Biopsie exérèse = nodule cutané complet Micro biopsie par endoscope = gastrique, intestinale, colique, bronchique…. Pièces opératoires chirurgicales= mastectomie استئصال الثدي avec curage ganglionnaire, gastrectomie partielle, hémi colectomie, néphrectomie…. Autopsies ou nécropsies= médico-scientifiques, ou médico-légales. 2-la démarche technique des prélèvements biopsiques= Chez le médecin prescripteur= Prélèvement après fixation immédiate. Souvent le formol dilué à 10% seul ou associé. Mettre le formol puis le prélèvement dans un pot conforme à ouverture large. Le volume suffisant environ 20 fois plus. Temps de fixation 6-48 h. Remarque = étape indispensable, évite la dégradation et conserve les structures originelle. Envoi au labo l’anapath avec un bulletin dument rempli de renseignements cliniques. -au service d’anapath = Réception= au secrétariat, enregistrement. Numérotation, année retranscrite sur les blocs, les lames, le compte rendu. La macroscopie= par l’anatomopathologiste= Identification du prélèvement Description à l’œil nu de la pièce opératoire, de la lésion= siège, aspect, couleur, consistance, dimensions, limites, d’exérèse Réalisation d’échantillons représentatifs de 2,5cm-3mm Les ganglions doivent être recherchés, comptés, mesurés. -technique de base= Une série de manipulations indispensables et respectives par le technicien= -la déshydratation à l’éthanol, éclaircissement au toluène imprégnation et inclusion en paraffine à 56 ﹾ. L’enrobage en les blocs. -la microtomie=coupes en moyenne de 5µ au microtome étalées. -la coloration standard ou topographique à l’hématoxyline-éosine-safran HES Lecture et interprétation au microscope par le médecin= en tenant compte des renseignements cliniques, radiologiques -compte-rendu au clinicien comportant une description morphologique des lésions et la conclusion à savoir le diagnostic et le pronostique-classification grade et stade d’infiltration pour les tumeurs selon p.T.N.M. - LES TECHNIQUES SPPECIALES= =examen extemporané= En per opératoire, rapide 15 min But= diagnostic rapide qui conditionne le geste chirurgical en cours ex malignité, élargir une exérèse. Méthode= cryotomie de fragments tissulaires congelés. Coloration rapide exp= bleu de toluidine mais examen limité fragment pour un examen différé classique avec l’inclusion en paraffine. =la décalcification= Après la fixation avant la circulation, elle s’adresse aux prélèvements durs afin d’éliminer le calcium du tissu à étudier exp= les os, ongles, les cartilages pour les ramollir au moyen d’un agent décalcifiant, il existe pls agents décalcifiants, dont les acides comme l’acide nitrique, l’acide chlorhydrique. Le volume de l’agent décalcifiant devrait être de 20 à 50 fois sup au volume du tissu, l’agent décalcifiant est remplacé régulièrement, selon le type d’agent utilisé et le nombre de pièces à décalcifier. =l’histochimie = Recherche d’une substance chimique ou un constituant particulier exp= fibrose ou dépôts de fer. =lhistomorphometrie= L’intérêt =étude de l’évolution de la microarchitecture dans les ostéopathies notamment métaboliques exp= ostéoporose Principe= biopsie au nv de l’os spongieux de la crête iliaque d’un patient sans décalcifier. Inclusion dans une résine et on fait des coupes de 7 microns avec un microtome adéquat. On colore. On interprète, on évalue la qualité et la quantité de l’os …volume osseux par rapport au champ qui doit avoir une surface sup ou égale à 11% , épaisseur des corticales, amincissement des travées osseuses, la connexion des travées, le remodelage osseux =l’examen en lumière polarisé= Son intérêt = utilisée en anatomie pathologie pour la détection d’éléments biréfringents= cristaux, collagène de type 1, dichroïsme vert jaune du rouge Congo fixé sur la substance amyloïde. Le principe on utilise un microscope muni d’un filtre polarisant qui dirige les faisceaux de lumière concentres rendant le prélèvement ceux-ci apparaissent lumineux, voire de couleurs différentes. Exp= les dépôts d’amylose rénale colorés en rouge montrent une biréfringence rouge-verte. =l’immuno- histochimie= Principe= utilisation des ATcorps mono-ou poly clonaux pour détecter des AG sur un matériel cytologique ou des coupes tissulaires. Ces substances souvent des protéines sont appelés les marqueurs tumoraux. Buts= -cancérologie +++ .les cellules tumorales expriment des ATg, recherche de marqueurs tumoraux pour l’établissement de diagnostic, du pronostic. Pour établissement d’une thérapie ciblée et suivi thérapeutique de la Mdie oncologique. Rechercher l’origine d’un processus tumoral néoplasique indifférencié par des marqueurs= cytokératine CK= origine épithéliale. Desmine=origine conjonctive, myogenine= origine musculaire, S100= nerveuses, HMB 45 mélanique…. Pronostique d’agressivité = Ki67, her2, p53 But thérapeutique= l’hormonothérapie bloque la réponse aux œstrogènes en cas de positivité des récepteurs Typage d’un lymphome par le cluster de différenciation CD en vue d’un protocole thérapeutique adapté. Détection de micro métastases ganglionnaires. Rechercher anomalies génétiques syndromes tumoraux -maladies auto-immunes= détection des ATcorps, antinucléaires, anti organites…. -microbiologie= bactériologie, virologie. Méthodes= Exploitent le fait que des anticorps se lient spécifiquement à des antigènes dans les tissus biologiques. -immun peroxydase= sur bloc en paraffine, la coupe contient l’antigène à étudier, l’anticorps est conjugué à une enzyme peroxydase qui catalyse la réaction de production de couleur. -immuno- fluorescence= sur bloc en congélation, ces méthodes utilisent des ATcorps marqués à la fluorescéine pour localiser directement les protéines cellulaires dans des coupes de tissus, visualisées dans un microscope à fluorescence à fond noir. =la biologie moléculaire= l’hybridation in situ But = utilisé en cancérologie pour rechercher des anomalies chromosomiques exp= translocation, surexpression dans des tumeurs malignes. Le principe= coupes en congélation ou coupes en paraffine ou cellules fixées. Deux étapes avec un thermocycleur= Dénaturation des acides nucléiques cibles= ouverture de l’hélice en deux monobrins, hybridation avec une petite séquence d’acides nucléiques complémentaire à la cible appelée sonde préalablement marquée un isotope radioactif ou un fluorochrome. Exp= la FHIS= émission d’un signal fluorescent, le tout devient donc visible par un microscope a fluorescence. = la PCR= Technique d’amplification d’ADN in vitro permettant d’obtenir un très grand de copies d’une séquence d’ADN qui devient visible. Principe= PCR se fait bloc congelés ou inclus en paraffine. Trois étapes= dénaturation , hybridation avec amorces spécifiques, polymérisation élongation = un cycle Le cycle sont multiplies = grand nombres de copies. uploads/Sante/ chapitre-1-anapath.pdf